本發明公開了一種通過葉叢芽進行兜蘭優質種苗組織培養快速繁殖方法。本發明采用兜蘭的側芽為外植體，采用獨特的外植體切割處理和培養基進行葉叢芽的誘導、增殖和分化成正常不定芽，然后進行生根壯苗培養從而獲得大量均一的組培苗。本發明的通過葉叢芽進行兜蘭優質種苗組織培養快速繁殖方法，能成功地進行葉叢芽誘導、增殖和恢復為正常的不定芽，每團葉叢芽在半年時間內獲得89?122個不定芽，獲得的不定芽經過6?8個月的生根壯苗培養即可移栽，從而實現兜蘭組培苗規模化、商品化生產。本發明的培養方法和使用的培養基成分獨特且簡單實惠，培養體系穩定，技術切實可行，應用價值高，為提高兜蘭繁殖效率，滿足兜蘭市場需求提供一條有效的途徑。

1.一種通過葉叢芽進行兜蘭優質種苗組織培養快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：a、無菌不定芽的獲得：切取兜蘭的側芽作為外植體，經消毒后，接種到不定芽誘導培養基中，然后加入頭孢呋辛鈉溶液覆蓋培養基表面，培養溫度25℃-29℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時/天，獲得不定芽，所述的不定芽誘導培養基為：每升含有椰子乳20-50mL、BA 5-10 mg、蔗糖15-20 g、NaH₂PO₄ 0.17-0.34 g和瓊脂4.5-5.0 g，其余為1/4-1/2MS培養基，pH 5.8-6.0；b、葉叢芽誘導與增殖：縱切不定芽的生長點，接種至葉叢芽誘導培養基中，培養溫度25℃-29℃，光照度1500-2000 lx，光照12-16小時/天，直至不定芽增殖分化成葉叢芽；將葉叢芽切下來，縱切其生長點，接種至葉叢芽增殖培養基中進行葉叢芽增殖培養，培養溫度25℃-29℃，光照度1500-2000 lx，光照12-16小時/天，葉叢芽增殖培養繼代周期為60天，每次培養均將上一次培養獲得的葉叢芽切割，同時縱切葉叢芽的生長點；所述的葉叢芽誘導培養基為：每升含有椰子乳150-200 mL、TDZ 0.75-1.5 mg、蔗糖20-30 g、NaH₂PO₄ 0.17-0.34g和瓊脂4.5-5.0 g，其余為1/2-1MS培養基，pH 5.8-6.0；所述的葉叢芽增殖培養基為：每升含有椰子乳150-200 mL、TDZ 0.25-0.7 mg、蔗糖20-30 g、NaH₂PO₄ 0.17-0.34 g和瓊脂4.5-5.0 g，其余為1/2-1MS培養基，pH 5.8-6.0；c、葉叢芽恢復成正常的不定芽：將葉叢芽增殖培養獲得的葉叢芽切割，同時縱切葉叢芽的生長點，接種至葉叢芽恢復常芽培養基中，培養溫度25℃-29℃，光照度1500-2000 lx，光照12-16小時/天，葉叢芽增殖分化出不定芽；所述的葉叢芽恢復常芽培養基為：每升含有椰子乳25-50 mL、蔗糖10-20 g、NaH₂PO₄ 0.17-0.34 g、蛋白胨2-4 g和瓊脂4.5-5.0 g，其余為1/4-1/2MS培養基，pH 5.8-6.0；d、不定芽的生根壯苗培養：將不定芽從成團不定芽中分離出來接種至生根壯苗培養基中，培養溫度25℃-29℃，光照度1500-2000 lx，光照12-16小時/天，獲得生根的組培苗；所述的生根壯苗培養基為：每升含有椰子乳50-75 mL、蔗糖15-25 g、NaH₂PO₄ 0.17-0.34 g、NAA 0.5-1 mg、活性炭0.3-0.5 g和瓊脂4.5-5.0 g，其余為改良MS培養基，pH 5.8-6.0；所述的改良MS培養基是將MS培養基中的NH₄NO₃和KNO₃改變為原來的1.5-2倍，其余成份不變；e、組培苗的移栽：將組培苗移入栽培基質中培養獲得兜蘭種苗，所述的栽培基質為植金石、樹皮和椰殼按體積比為1-3:1-3:1混合的混合基質。2.根據權利要求1所述的通過葉叢芽進行兜蘭優質種苗組織培養快速繁殖方法，其特征在于，所述的切取兜蘭的側芽作為外植體，經消毒后，接種到不定芽誘導培養基中具體為：在切取外植體前14 d用80-100 mg/L的硫酸鏈霉素溶液澆灌根部一次，間隔7天后再用80-100 mg/L的硫酸鏈霉素溶液澆灌根部一次，切取側芽，然后在超凈工作臺上將切下的側芽先用體積分數75%-80%的酒精水溶液浸泡30-60秒，切掉葉片，再用體積分數75%-80%的酒精水溶液浸泡30-60秒，無菌水沖洗3-5次，再用質量分數0.1%-0.2%的升汞水溶液消毒5-10分鐘，無菌水沖洗4-5次，接種到不定芽誘導培養基中。3.根據權利要求1所述的通過葉叢芽進行兜蘭優質種苗組織培養快速繁殖方法，其特征在于，所述的頭孢呋辛鈉溶液為質量分數為11%-20%的頭孢呋辛鈉溶液。