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一種水櫟組織培養繁殖方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-15
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310519136.9 
  • 技術(專利)名稱 一種水櫟組織培養繁殖方法 
  • 項目單位 江蘇省林業科學研究院
  • 發明人 黃利斌,張敏,陳智敏,竇全琴,董筱昀 
  • 行業類別 中藥材獲取-植物藥材種植
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 衛耀娟
  • 發布時間 2022-01-15  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種水櫟新品種組織培養繁殖方法,包括選材、消毒處理、試管芽苗培養、壯苗培養、增殖培養、生根培養、移栽、成活一系列操作;在體胚誘導、增殖、成熟、萌發培養的培養基中進行培養。本發明具有繁殖系數高,繁殖時間不受季節限制,取材對母體傷害小,無病蟲害困擾,在水櫟苗木生產及科研中均具有重要的應用價值。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種水櫟組織培養繁殖方法,其特征在于:包括以下步驟:(1)選材:于十月末在引種的十年生水櫟樹上采集種子,采用水浸法除去壞種子,將選出的種子置于沙、蔬菜顆粒肥、蘆葦炭、草碳混合物的基質中培養,取水櫟種子繁育的優良實生幼苗嫩莖為接種材料;所述沙、蔬菜顆粒肥、蘆葦炭、草碳混合物體積比為4:1:1:1;(2)消毒處理:將幼苗嫩莖進行消毒處理;(3)試管芽苗培養:在無菌條件下,將步驟(2)中消毒后的外植體剪去接觸消毒液的傷口,留1~2cm帶芽莖段接種在經消毒的含有啟動培養基的玻璃培養瓶中,然后將其置于普通日光燈為光源的環境下,濕度為50%~65%,培養22~25天,分化長成試管芽苗;所述啟動培養基配方為:WPM基本培養基、0.01mg·L-16-BA、0.02mg·L-1NAA、30g·L-1蔗糖、6.5g·L-1卡拉膠;所述啟動培養基的pH值控制在5.7~5.8;(4)壯苗培養:將步驟(3)中獲得的試管芽苗,剪切帶有1~2個腋芽的莖段或頂芽后,轉接于經消毒的含有壯苗培養基的玻璃培養瓶中,濕度為50%~65%的條件下,進行壯苗培養,15~18天后進入下一步驟;所述壯苗培養基配方為:WPM基本培養基、0.01mg·L-16-BA、0.02mg·L-1NAA、0.5mg·L-1玉米素、30g·L-1蔗糖、6.5g·L-1卡拉膠;所述壯苗培養基配方pH值控制在5.7~5.8;(5)增殖培養:將從步驟(4)中長成的試管芽苗,剪切帶有1~2個腋芽的莖段或頂芽后,轉接于增殖培養基中,濕度50%~65%;增殖培養15~20天;所述增殖培養基配方為:WPM基本培養基、0.1mg·L-16-BA、0.02mg·L-1NAA、30g·L-1蔗糖、6.5g·L-1卡拉膠;增殖培養基pH值控制在5.7~5.8;(6)生根培養:將步驟(5)中獲得的試管苗,去掉基部組織和部分葉片,留3~4片葉片,在無菌條件下,接種于經消毒的含有生根培養基的玻璃培養瓶中,在光照強度為1600~2500lx,每日光照時間為16小時,溫度為(25±2)℃,濕度為50%~65%的條件下,進行生根培養15天后轉至不含激素的WPM培養基中繼續培養15~20天;所述生根培養基配方為:WPM基本培養基、1.5mg·L-1IBA、30g·L-1蔗糖、6.5g·L-1卡拉膠,所述生根培養基的pH值為5.7~5.8;(7)移栽、成活:將步驟(6)中獲得的生根瓶苗,取出洗凈,移栽到含有泥炭和黃心土的基質中,然后澆透水,用塑料薄膜覆蓋容器口,保持溫度25~30℃,相對濕度75%~85%,培養30~35天;所述的WPM基本培養基即木本植物組織培養基的具體配方如下:2.根據權利要求1所述的水櫟組織培養繁殖方法,其特征在于:所述步驟(3)、步驟(4)、步驟(5)、步驟(6)中的培養條件為:光照強度為1600~2500lx,每日光照時間為16h,溫度為(25±2)℃。3.根據權利要求1所述的水櫟組織培養繁殖方法,其特征在于:所述步驟(2)中的消毒處理過程包括:選取的外植體剪切成3~4cm長的小段,用洗衣粉溶液浸泡5min,自來水沖洗10次,轉入超凈工作臺,放入無菌燒杯中,用70%的酒精進行表面消毒30s,無菌水沖洗3次,再用濃度為0.1%的升汞溶液消毒4.5分鐘,最后用無菌水沖洗6次。4.根據權利要求1所述的水櫟組織培養繁殖方法,其特征在于:所述步驟(7)中的泥炭與黃心土的體積比為1:1~1:1.5。
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