1.一種防治煙草赤星病的菌劑,該菌劑的生產菌株分類命名為枯
草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)B75,保藏編號為CGMCC?No.1700,其
特征在于,所述菌株的培養基配方如下:①試管斜面培養基配方為:牛肉浸
膏3g,大豆蛋白胨5g,葡萄糖5g,瓊脂17~20g和蒸餾水1000ml,pH6.8~
7.2;②液體發酵培養基配方為:大豆蛋白胨10g、蔗糖5g、酵母膏2g、
甘露糖2g、硝酸鉀1g、硫酸銨1g和自來水1000ml,pH6.4~6.8。
2.一種制備權利要求1所述的防治煙草赤星病的菌劑的方法,其特征在于,
所述的菌劑為液體時,該方法包括以下步驟:
(1)試管種培養
試管斜面培養基配方為:牛肉浸膏3g,大豆蛋白胨5g,葡萄糖5g,瓊
脂17~20g和蒸餾水1000ml,pH6.8~7.2;將枯草芽孢桿菌(Bacillus
subtilis)B75移到試管斜面培養基上,在30℃±1℃恒溫培養1~2天,
獲得試管種;
(2)搖瓶液體發酵培養
液體發酵培養基配方為:大豆蛋白胨10g、蔗糖5g、酵母膏2g、甘露
糖2g、硝酸鉀1g、硫酸銨1g和自來水1000ml,pH6.4~6.8;將每支試管
斜面加無菌水5~10ml,用接種環刮下菌苔,并搖勻形成細菌懸液,以0.5%
的體積比接入裝培養液的容積與容器的容積比為30%~50%的三角瓶中,于
30℃±1℃恒溫、180~220轉/分鐘轉速振蕩培養30~36小時;
(3)制劑化
發酵后的菌液經平板計數測定含菌量,當含菌量達150億cfu/ml以上時,
加入0.5%羧甲基纖維素鈉、0.2%的十二烷基磺酸納和5%~10%的菌核凈,50
轉/分鐘轉速漸漸加速攪拌至250轉/分鐘時,恒速連續攪拌15分鐘,得到所
需的液體菌劑。
3.一種制備權利要求1所述的防治煙草赤星病的菌劑的方法,其特征在
于,所述的菌劑為固體時,該方法包括以下步驟:
(1)試管種培養
試管斜面培養基配方為:牛肉浸膏3g,大豆蛋白胨5g,葡萄糖5g,瓊
脂17~20g和蒸餾水1000ml,pH6.8~7.2;將枯草芽孢桿菌(Bacillus
subtilis)B75移到試管斜面培養基上,在30℃±1℃恒溫培養1~2天,
獲得試管種;
(2)搖瓶液體發酵培養
液體發酵培養基配方為:大豆蛋白胨10g、蔗糖5g、酵母膏2g、甘露
糖2g、硝酸鉀1g、硫酸銨1g和自來水1000ml,pH6.4~6.8;將每支試管
斜面加無菌水5~10ml,用接種環刮下菌苔,并搖勻形成細菌懸液,以0.5%
的體積比接入裝培養液的容積與容器的容積比為30%~50%的三角瓶中,于
30℃±1℃恒溫、180~220轉/分鐘轉速振蕩培養30~36小時;
(3)制劑化
發酵后的菌液經平板計數測定含菌量,當含菌量達150億cfu/ml以上時,
加入0.5%羧甲基纖維素鈉、0.2%的十二烷基磺酸納、5%~10%的菌核凈和質量
比9∶1硅藻土與輕質碳酸鈣,混勻、打漿、噴霧干燥,制成的可濕性粉劑即為
所需的固體菌劑。
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