本發(fā)明公開了一種黃曲霉毒素B的制備方法，將接種培養(yǎng)后的菌種3.6156置于發(fā)酵培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，再用提取液提取AFB，然后將含有AFB的提取液減壓濃縮，所得濃縮液經(jīng)處理后得黃曲霉毒素B（AFB），在霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)通過變溫培養(yǎng)，提高了真菌毒素產(chǎn)量，達到0.53%，采用含有甲酸的乙酸乙酯、乙腈混合提取液，提取徹底并穩(wěn)定，通過氮氣吹干AFB1結(jié)晶產(chǎn)品純度提高到98.0%以上。

1.一種黃曲霉毒素B₁的制備方法，其特征在于：將接種培養(yǎng)后的寄生曲霉3.6156置于發(fā)
酵培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，再用提取液提取黃曲霉毒素B₁，然后將含有黃曲霉毒素B₁的提取液減
壓濃縮，所得濃縮液經(jīng)處理后得黃曲霉毒素B₁；
所述制備方法包括發(fā)酵培養(yǎng)基的制備步驟：
發(fā)酵培養(yǎng)基包括花生殼、花生渣、蔗糖、麩皮、尿素和水，先將尿素和蔗糖溶解在水中，
然后加入花生殼、花生渣和麩皮，攪拌均勻，高溫高壓滅菌；
還包括接種培養(yǎng)步驟：
取4℃保藏的寄生曲霉3.6156放置至室溫，無菌操作接種到PDA液體培養(yǎng)基；
將接種后的PDA培養(yǎng)基放置到搖床培養(yǎng)，溫度控制在30℃，轉(zhuǎn)速160轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時間3
天；
還包括發(fā)酵接種步驟：
將接種培養(yǎng)后的菌種全部轉(zhuǎn)移到發(fā)酵培養(yǎng)基，攪拌均勻；
還包括發(fā)酵步驟：
將含有菌種的發(fā)酵培養(yǎng)基放置在霉菌培養(yǎng)箱，在30℃下培養(yǎng)3天，降低溫度到26℃培養(yǎng)
3天，再降低溫度到22℃繼續(xù)培養(yǎng)10天；
還包括滅菌步驟：
將經(jīng)發(fā)酵步驟后的發(fā)酵培養(yǎng)基經(jīng)100℃高壓滅菌30min；
還包括提取步驟：
將乙酸乙酯、乙腈和甲酸按照體積比799:200:1混勻為混合提取液；
分兩次取混合提取液并置于滅菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基，振蕩搖勻，過濾收集后離心，3000
轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，收集上清液；合并兩次上清液；
還包括濃縮凈化步驟：
將上清液減壓濃縮到50±2mL/1000mL上清液，將C18粉、PSA粉、氨丙基粉和無水硫酸
鎂，與濃縮液混合后振蕩渦混1分鐘，10000轉(zhuǎn)/分離心后上層清液過0.22μm的濾膜凈化過
濾；
每50±2mL濃縮液用C18粉0.5g、PSA粉0.5g、氨丙基粉1g和無水硫酸鎂15g。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述制備方法還包括將濃縮凈化步驟過
濾后的凈化液轉(zhuǎn)移至潔凈試管，30℃水浴氮氣吹干。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述花生殼、花生渣、蔗糖、麩皮、尿素和
水的重量份比25：42：2：22：1：8。