本發明涉及細胞工程技術領域，具體為一種從人脂肪組織中分離人脂肪干細胞的方法。本發明通過在生理鹽水中加入少量的低分子肝素鈣，以此作為清洗液清洗人脂肪組織，可很好的去除人脂肪組織中殘留的紅細胞等雜質，從而可分離出純度更高的人脂肪干細胞，雜細胞含量顯著減少，有利于人脂肪干細胞的分化誘導，并且可減少Ⅰ型膠原酶、胰蛋白酶及無血清培養基的消耗量，降低工藝成本。此外，以150r/min的速度離心消化人脂肪組織1h，可得到活性明顯較好的人脂肪干細胞。

1.一種從人脂肪組織中分離人脂肪干細胞的方法，包括清洗人脂肪組織步驟、膠原酶
消化步驟和收集人脂肪干細胞步驟，其特征在于，所述清洗人脂肪組織步驟為：用清洗液反
復沖洗人脂肪組織兩遍以上，以除去人脂肪組織中的血液；所述清洗液為含低分子肝素鈣
的生理鹽水，所述清洗液中低分子肝素鈣的質量百分比為0.5％；所述膠原酶消化步驟為：
將清洗后的人脂肪組織和Ⅰ型膠原酶溶液置于離心管中，然后將離心管置于37℃下，以
150r/min的離心速率消化1h；所述Ⅰ型膠原酶溶液中Ⅰ型膠原酶的濃度為1.5％(m/v)，所述
膠原酶消化步驟中，離心管內人脂肪組織與Ⅰ型膠原酶溶液的體積比為1:1。
2.根據權利要求1所述一種從人脂肪組織中分離人脂肪干細胞的方法，其特征在于，所
述收集人脂肪干細胞步驟為：取離心管底層含單個核細胞的液體并經孔徑為100μm的濾網
過濾，得過濾液；然后向過濾液中加入生理鹽水并離心分離，除去上層清液后得人脂肪干細
胞。
3.根據權利要求1所述一種從人脂肪組織中分離人脂肪干細胞的方法，其特征在于，所
述收集人脂肪干細胞步驟中，以1500r/min的速率離心10min。
4.根據權利要求1-3任一項所述一種從人脂肪組織中分離人脂肪干細胞的方法，其特
征在于，收集人脂肪干細胞步驟后，還包括細胞原代培養步驟。
5.根據權利要求4所述一種從人脂肪組織中分離人脂肪干細胞的方法，其特征在于，細
胞原代培養步驟后，還包括細胞傳代培養步驟，獲得傳代培養后的人脂肪干細胞。