本發明涉及一種提高骨髓間充質干細胞成脂分化效率的方法，包括MSC的提取及原代培養、MSC的傳代培養和MSC的成脂分化表征。該方法控制細胞傳代培養時培養液的更換量以及細胞的培養周期，得到不同數量的脂肪細胞，從而在不含有誘導因子的情況下仍能在聚苯乙烯細胞培養基底表面獲得很高的MSC成脂分化效率。該方法具有體系簡單、不含有額外生物因子、無細胞毒性、重復性高等特點。此方法能滿足干細胞的體外培養以及臨床應用的需求。

1.一種提高骨髓間充質干細胞成脂分化效率的方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）選取大鼠骨髓間充質干細胞作為細胞模型，利用全骨髓貼壁法從新生SD大鼠的脛骨和股骨骨髓腔中提取MSC并進行培養，MSC的培養液為含有10%（體積比）胎牛血清(FBS)、100 U/mL青霉素、100 μg/mL鏈霉素以及2 mM L-谷氨酰胺的低糖DMEM培養基，MSC提取后置于37 °C、5% CO₂的培養箱中進行原代培養，每2~3天進行更換一次新的培養液，直至MSC基本鋪滿培養瓶底，然后進行傳代培養，傳代時間不需要過早；（2）在進行細胞傳代時，首先進行消化和離心操作，在離心結束后，吸出上層清液，即原先的細胞培養液，并不丟棄，而是將其與新配制的細胞培養液按80:20的體積比進行混合，然后重新加入離心管后進行重懸，并將MSC接種在細胞培養瓶表面，繼續在37 °C和5% CO₂的條件下進行MSC培養，待MSC接近長滿后重復進行傳代操作；（3）經過3次傳代培養之后，對MSC進行油紅染色來檢測脂肪細胞特異性表達物脂肪滴的產生和積聚以表征MSC成脂分化程度，首先用4%多聚甲醛對細胞進行固定，然后用3 mg/mL油紅/異丙醇溶液進行脂肪滴染色，最后以2 μg/mL的DAPI溶液進行細胞核染色，于倒置熒光顯微鏡下進行觀察和分析，統計出成脂分化的細胞數占細胞總數的百分比。2.一種提高骨髓間充質干細胞成脂分化效率的方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）選取大鼠骨髓間充質干細胞作為細胞模型，利用全骨髓貼壁法從新生SD大鼠的脛骨和股骨骨髓腔中提取MSC并進行培養，MSC的培養液為含有10%（體積比）胎牛血清(FBS)、100 U/mL青霉素、100 μg/mL鏈霉素以及2 mM L-谷氨酰胺的低糖DMEM培養基，MSC提取后置于37 °C、5% CO₂的培養箱中進行原代培養，每2~3天進行更換一次新的培養液，直至MSC基本鋪滿培養瓶底，然后進行傳代培養，傳代時間不需要過早；（2）在進行細胞傳代時，首先進行消化和離心操作，在離心結束后，吸出上層清液，即原先的細胞培養液，并不丟棄，而是將其與新配制的細胞培養液按50:50的體積比進行混合，然后重新加入離心管后進行重懸，并將MSC接種在細胞培養皿表面，繼續在37 °C和5% CO₂的條件下進行MSC培養，待MSC接近長滿后重復進行傳代操作；（3）經過5次傳代培養之后，對MSC進行油紅染色來檢測脂肪細胞特異性表達物脂肪滴的產生和積聚以表征MSC成脂分化程度，首先用4%多聚甲醛對細胞進行固定，然后用3 mg/mL油紅/異丙醇溶液進行脂肪滴染色，最后以2 μg/mL的DAPI溶液進行細胞核染色，于倒置熒光顯微鏡下進行觀察和分析，統計出成脂分化的細胞數占細胞總數的百分比。3.一種提高骨髓間充質干細胞成脂分化效率的方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）選取大鼠骨髓間充質干細胞作為細胞模型，利用全骨髓貼壁法從新生SD大鼠的脛骨和股骨骨髓腔中提取MSC并進行培養，MSC的培養液為含有10%（體積比）胎牛血清(FBS)、100 U/mL青霉素、100 μg/mL鏈霉素以及2 mM L-谷氨酰胺的低糖DMEM培養基，MSC提取后置于37 °C、5% CO₂的培養箱中進行原代培養，每2~3天進行更換一次新的培養液，直至MSC基本鋪滿培養瓶底，然后進行傳代培養，傳代時間不需要過早；（2）在進行細胞傳代時，首先進行消化和離心操作，在離心結束后，吸出上層清液，即原先的細胞培養液，并不丟棄，而是將其與新配制的細胞培養液按20:80的體積比進行混合，然后重新加入離心管后進行重懸，并將MSC接種在細胞培養板表面，繼續在37 °C和5% CO₂的條件下進行MSC培養，待MSC接近長滿后重復進行傳代操作；（3）經過7次傳代培養之后，對MSC進行油紅染色來檢測脂肪細胞特異性表達物脂肪滴的產生和積聚以表征MSC成脂分化程度，首先用4%多聚甲醛對細胞進行固定，然后用3 mg/mL油紅/異丙醇溶液進行脂肪滴染色，最后以2 μg/mL的DAPI溶液進行細胞核染色，于倒置熒光顯微鏡下進行觀察和分析，統計出成脂分化的細胞數占細胞總數的百分比。