本發(fā)明涉及山茱萸多糖的分離方法及其應(yīng)用。分離山茱萸多糖的方法包括如下步驟：①原料用水漂洗；用水于煎煮兩次，過濾，合并濾液；②濾液用大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)吸附處理，吸附除去脂溶性成份和苦澀性物質(zhì)，得到口味微甜的流出液，將流出液濃縮成流膏狀濃縮物；③流膏狀濃縮物進(jìn)行兩次水溶、醇沉處理，接著將所得沉淀用乙醇洗滌，干燥，得到山茱萸多糖。還涉及所述山茱萸多糖的生物學(xué)用途以及包含所述山茱萸多糖的組合物。本發(fā)明山茱萸多糖呈現(xiàn)如說明書所述諸多有益效果，例如其能夠補(bǔ)腎陽，抗皮質(zhì)激素副作用，抗氧化，抗腫瘤，提高免疫力，提高生命活力，改善性功能。可用來制成補(bǔ)益類口服液，或制作補(bǔ)益類保健飲料及保健酒等，應(yīng)用前景廣闊。

1.分離山茱萸多糖的方法，該方法以山茱萸的成熟果肉為原料，包括如下步驟：
①將原料用水漂洗以除去灰塵；用3~4倍量的水于50~100℃煎煮兩次，每次30~90分鐘，
過濾，果渣任選用3~4倍量的熱水洗滌一次，合并兩次濾液和洗液；
②濾液中添加重量/體積百分?jǐn)?shù)為0.15%的氯化鈉和重量/體積百分?jǐn)?shù)為0.02%的冰乙
酸，再采用大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)吸附處理，吸附除去脂溶性成份和苦澀性物質(zhì)，得到口味微甜
的流出液，將流出液濃縮成流膏狀濃縮物；
③流膏狀濃縮物進(jìn)行兩次水溶、醇沉處理，醇沉?xí)r使用濃度為70-90%的乙醇，接著將所
得沉淀用95%的乙醇洗2次，真空干燥，得到山茱萸多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中步驟①所述的水煮溫度為80~100℃，時(shí)間為1小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中步驟②所述大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)處理時(shí)，水煮濾液先經(jīng)樹
脂NKA-9動(dòng)態(tài)吸附，再經(jīng)樹脂X-5動(dòng)態(tài)吸附，去除非多糖的物質(zhì)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中步驟③所述流膏狀濃縮物進(jìn)行兩次水溶、醇沉處理，醇
沉使乙醇濃度達(dá)到80-85%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其包括如下步驟：
①取山茱萸干果肉，用水漂洗兩次，除去灰塵，以4倍量的水80～100℃煎煮60分鐘，過
濾，收集濾液，以3倍量的水80-100℃煎煮60分鐘，過濾，收集濾液；再以3倍量熱水洗渣一
次；合并洗液和兩次煎煮液，過濾，制成澄明濾液；
②澄明濾液中添加重量/體積百分?jǐn)?shù)為0.15%的氯化鈉和重量/體積百分?jǐn)?shù)為0.02%的
冰乙酸，再采用大孔吸附樹脂進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附處理，先以15：1比例大孔吸附樹脂NKA-9動(dòng)態(tài)吸
附處理，再以30：1比例的大孔吸附樹脂X-5動(dòng)態(tài)吸附處理；
③流膏狀濃縮物進(jìn)行兩次水溶、醇沉處理；醇沉?xí)r將95%的乙醇往濃縮水溶物里加，邊
加邊攪動(dòng)，使乙醇濃度達(dá)到80～85%，靜置后過濾，收集沉淀，再以95%乙醇洗滌沉淀兩次；真
空干燥，得到山茱萸多糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中動(dòng)態(tài)吸附處理時(shí)以α-萘酚試劑檢測。
7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述方法制得的山茱萸多糖在制備用于產(chǎn)生下列生理功能的產(chǎn)
品中的用途：補(bǔ)腎陽、抗皮質(zhì)激素副作用；抗自由基；抗腫瘤；提高免疫；壯陽，改善性功能；
增強(qiáng)生命活力。
8.一種組合物，其是呈口服液或保健飲料或保健酒的形式，該組合物中包括權(quán)利要求
1-6任一項(xiàng)所述方法制備得到的山茱萸多糖，以及任選的生理學(xué)可接受的載體。
9.測試權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述山茱萸多糖中莫諾苷和馬錢苷的含量的方法，該方法
包括如下步驟：
照中華人民共和國藥典2015年版四部通則0512所載高效液相色譜法的規(guī)范測定；
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，
以0.3%磷酸溶液為流動(dòng)相B，且該磷酸溶液中還包含0.01%酒石酸，按以下規(guī)定進(jìn)行梯度洗
脫：0~20分鐘期間流動(dòng)相A為7%且流動(dòng)相B為93%，20~50分鐘期間流動(dòng)相A從7%線性增加到
20%且流動(dòng)相B從93%線性減少到80%；檢測波長為240nm；柱溫為35°C；理論板數(shù)按馬錢苷峰
計(jì)算應(yīng)不低于10000；
對(duì)照品溶液的制備：取莫諾苷對(duì)照品、馬錢苷對(duì)照品適量，精密稱定，加80%甲醇制成每
1ml各含10μg的混合溶液，即得；
山茱萸藥材供試品溶液的制備：取過三號(hào)篩的山茱萸藥材粉末0.05g，精密稱定，置具
塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用80%甲
醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
山茱萸多糖供試品溶液的制備：取山茱萸多糖0.5g，精密稱定，置10 ml量瓶中，加流動(dòng)
相A與流動(dòng)相B以體積比20：80的混合液使溶解，定容至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
測定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液、山茱萸藥材供試品溶液與山茱萸多糖供試品溶液
各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，用外標(biāo)法以峰面積計(jì)算藥材和山茱萸多糖中的莫諾
苷和馬錢苷。