1.一種以番茄紅素ε環化酶基因ILP標記對煙草制品進行鑒定的方法,其特征在于,提
取待測樣品的DNA;分別以CTGATGTGTTGCTGTGCTAGG、AATGCACTTCGCAAGCTCTA作為上下游引
物進行PCR擴增反應,反應結束后凝膠電泳檢測擴增產物,在450 bp、550 bp位置處均出現
電泳條帶,則判定樣品為煙草制品。
2.如權利要求1所述以番茄紅素ε環化酶基因ILP標記對煙草制品進行鑒定的方法,其
特征在于,所述待測樣品的DNA 提取具體如下:
1)取待測樣品碾磨成細粉末,放入2 mL離心管中;
2)加入600~800 μL、溫度60±5℃的CTAB提取緩沖液,混勻,每3~5min震蕩2~5次,20min
后12000 r/min離心10~15 min;
3)吸取上清液,分別加入與上清液體積相同的苯酚、氯仿,混勻,4℃、12000 r/min離心
10~15 min;
4)吸取上清液,加入等體積的氯仿,混勻,4℃、12000 r/min離心10~15 min,重復多次
至蛋白層不出現為止;
5)取上清液,-20℃沉淀1~2h,4℃、12000 r/min離心10~15 min;
6)棄去上清液,用50~70%乙醇洗滌沉淀2次;室溫下干燥后,于-20℃或者-70℃保存備
用。
3.如權利要求1所述以番茄紅素ε環化酶基因ILP標記對煙草制品進行鑒定的方法,其
特征在于,所述PCR擴增反應條件為:解鏈溫度95℃,30秒;退火溫度55℃,30秒;延伸溫度68
℃,30秒;重復35個循環。
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