本發(fā)明公開了一種轉(zhuǎn)基因馬鈴薯AV43?6?G7品系鑒定的引物、探針和方法，引物和探針序列是：上游引物Potato AV43?6?G7 primerF：5’?ggtatcaggttctggaataagaccaa?3’；下游引物Potato AV43?6?G7 primerR：5’?tgtcgtgccagctgcatta?‘3；探針Potato AV43?6?G7 Probe：5’?FAM?cccgcgcgttggccgat?3’BHQ。鑒定方法包括產(chǎn)品DNA的提取、特異性基因的實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增和使用熒光定量PCR儀隨機(jī)軟件分析擴(kuò)增結(jié)果并進(jìn)行結(jié)果判定。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是快速、特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、成本低。

1.轉(zhuǎn)基因馬鈴薯AV43-6-G7品系鑒定的引物和探針，其特征在于，所述引物和探針的序
列是：
上游引物Potato AV43-6-G7 primerF：5’-ggtatcaggttctggaataagaccaa-3’；
下游引物Potato AV43-6-G7 primerR：5’-tgtcgtgccagctgcatta-3’；
探針Potato AV43-6-G7 Probe ：5’-FAM- cccgcgcgttggccgat- BHQ-3’。
2.一種使用權(quán)利要求1所述的引物和探針進(jìn)行轉(zhuǎn)基因馬鈴薯AV43-6-G7品系鑒定的方
法，其特征在于，依次包括下列步驟：
（1）在PCR反應(yīng)管中加入24μL PCR擴(kuò)增反應(yīng)液A和1μL 樣品DNA，混勻；
（2） 將PCR反應(yīng)管放入熒光定量PCR儀，按下述反應(yīng)條件完成PCR擴(kuò)增：
95℃ 15min，1個(gè)循環(huán)預(yù)變性；
95℃ 15sec，59℃ 1min，40個(gè)循環(huán)；
（3）應(yīng)用熒光定量PCR儀隨機(jī)軟件，測(cè)定擴(kuò)增曲線的Ct值；
有PCR擴(kuò)增曲線且Ct值≤38判定為檢出，無PCR擴(kuò)增曲線或者PCR擴(kuò)增曲線但有Ct值>38
判定為未檢出；
其中， PCR 擴(kuò)增反應(yīng)液A：
包括1×PCR Master Mix，所述1×PCR Master Mix內(nèi)含熱啟動(dòng)的Taq DNA 聚合酶、氯
化鎂、dNTP，400 nmol/L上下游引物；
上游引物Potato AV43-6-G7 primerF：5’-ggtatcaggttctggaataagaccaa-3’，下游引
物Potato AV43-6-G7 primerR：5’-tgtcgtgccagctgcatta-3’，探針Potato AV43-6-
G7Probe：5’-FAM- cccgcgcgttggccgat- BHQ-3’；
其中上游引物、下游引物和探針比例為2 ：2 ：1；
其中dNTP 內(nèi)的四種脫氧核糖核酸的混合物的質(zhì)量比為dTTP: dATP: dGTP: dCTP =1:
1:1:1。