1.一種神經外科手術后顱內細菌性感染常見致病細菌MLPA檢測探針,其特征在于:包
括第一組探針至第十七組探針,依序為檢測腦膜炎奈瑟氏菌、綠膿假單胞菌、沙門氏菌屬、
嗜麥芽寡養單胞菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、克雷伯氏肺炎菌、粘質沙雷氏菌、魯氏
不動桿菌、白喉桿菌、緩癥鏈球菌、鮑氏不動桿菌、肺炎鏈球菌、痤瘡丙酸桿菌、李斯特氏菌、
陰溝腸桿菌和流感嗜血桿菌的探針,每組探針分別由左側探針LPO和右側探針RPO組成,所
述左側探針由雜交序列和連接在雜交序列5’端的如SEQ ID NO 37所示的上游通用引物序
列組成,所述右側探針由雜交序列、連接在雜交序列5’端的如SEQ ID NO 35所示的BsmI酶
切位點序列、連接在雜交序列3’端的EcoR V酶切位點序列GATATC以及連接在EcoR V酶切位
點序列3’端的SEQ ID NO 38的反向互補序列組成,其中,
第一組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 1所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 2所示;
第二組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 3所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 4所示;
第三組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 5所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 6所示;
第四組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 7所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 8所示;
第五組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 9所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 10所示;
第六組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 11所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 12所示;
第七組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 13所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 14所示;
第八組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 15所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 16所示;
第九組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 17所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 18所示;
第十組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 19所示,右側探針RPO的雜交序列
如SEQ ID NO 20所示;
第十一組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 21所示,右側探針RPO的雜交序
列如SEQ ID NO 22所示;
第十二組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 23所示,右側探針RPO的雜交序
列如SEQ ID NO 24所示;
第十三組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 25所示,右側探針RPO的雜交序
列如SEQ ID NO 26所示;
第十四組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 27所示,右側探針RPO的雜交序
列如SEQ ID NO 28所示;
第十五組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 29所示,右側探針RPO的雜交序
列如SEQ ID NO 30所示;
第十六組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 31所示,右側探針RPO的雜交序
列如SEQ ID NO 32所示;
第十七組探針的左側探針LPO的雜交序列如SEQ ID NO 33所示,右側探針RPO的雜交序
列如SEQ ID NO 34所示。
2.一種神經外科手術后顱內細菌性感染常見致病細菌MLPA檢測試劑盒,其特征在于:
包括權利要求1所述的探針。
3.如權利要求2所述的檢測試劑盒,其特征在于:還包括一對通用引物,所述通用引物
的上游引物和下游引物分別如SEQ ID NO 37和SEQ ID NO 38所示。
4.如權利要求3所述的檢測試劑盒,其特征在于:還包括Ligase-65、Ligase buffer、
Probe Mix和PCR Primer Mix,其中,
Ligase-65的配方為:1U/μL,其儲存液為pH 7.5的20mM Tris,50mM KCl,1mM DTT,
0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油;
Ligase buffer的配方為:10×Ligation Buffer:pH 7.8的400mM Tris,100mM MgCl2,
100mM DTT,5mM ATP;
Probe Mix的配方為:每個探針的濃度為4fM,工作液為pH 8.0的10mM Tris-Cl,1mM
EDTA;
PCR Primer Mix的配方為:含有所述通用引物的上游引物和下游引物,dNTPs 2.5mM;
工作液為pH 8.0的10mM Tris-Cl,1mM EDTA;每個引物的濃度為10pM,上游引物為Cy 5.0標
記。
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