本發(fā)明公開了一種雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針及其合成方法和應用。該陽離子型熒光探針的結構式為，其是以熒光量子產(chǎn)率高、對微環(huán)境極性敏感的丹磺酰作為信號輸出基團，通過二乙烯三胺兩端保護引入丹磺酰，然后二乙烯三胺兩端脫保護與溴乙酰溴反應，最后與N-甲基咪唑共價結合，合成雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針，其化學穩(wěn)定性好，能夠即時、在線測定氨基酸，對天冬氨酸或谷氨酸的響應速度快、靈敏度高、響應范圍寬，檢出限可分別達到1.6μmol/L和6.0μmol/L，實現(xiàn)了氨基酸的高選擇性、高靈敏度、低檢出限檢測。

1.一種雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針，其特征在于該熒光探針的結
構式如下所示：

2.一種權利要求1的雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針的合成方法，其
特征在于它由下述步驟組成：
(1)合成兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺
以N，N-二甲基甲酰胺為溶劑，將二乙烯三胺與叔丁基苯基碳酸酯、三乙胺按
摩爾比為3.2～5:8～12:1，在氮氣保護、冰浴條件下攪拌12～24小時，分離純化產(chǎn)
物，得到式Ⅰ所示的兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺；

(2)合成兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺丹磺酰衍生物
以三氯甲烷為溶劑，將兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺、丹磺酰氯、三乙胺
按摩爾比為1～1.5:1:2～3.5，在氮氣保護、常溫條件下攪拌12～36小時，所得反應
液用飽和食鹽水洗滌，有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸除三氯甲烷，依次用正己烷與
乙酸乙酯的體積比為5～8:1的混合物、正己烷與乙酸乙酯的體積比為1:1的混合物、
二氯甲烷和甲醇的體積比為50～60:1的混合物作為洗脫液柱層析純化產(chǎn)物，真空干
燥，得到式Ⅱ所示的兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺丹磺酰衍生物；

(3)合成兩端氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物
以二氯甲烷為溶劑，將兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、三氟
醋酸按摩爾比為1:80～90，在氮氣保護、冰浴條件下攪拌12～24小時，蒸除二氯
甲烷，加入蒸餾水溶解，然后用飽和碳酸鈉水溶液調節(jié)pH至9～11，用三氯甲烷
萃取，有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸除三氯甲烷，真空干燥，得到式Ⅲ所示的兩端
氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物；

(4)合成兩端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物
以三氯甲烷為溶劑，將兩端氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、溴乙酰溴、三乙
胺按摩爾比為1:2.5～4:25～27，在氮氣保護、冰浴條件下攪拌36～48小時，所得
反應液用去離子水洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥，蒸除三氯甲烷，用石油醚與乙酸
乙酯的體積比為1:3～5的混合液作為洗脫柱層析純化產(chǎn)物，真空干燥，得到式Ⅳ所
示的兩端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物；

(5)合成雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針
以四氫呋喃為溶劑，將兩端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、N-甲基咪唑按摩爾
比為1:4～6，在氮氣保護下加熱回流48～72小時，抽濾，所得固體在丙酮中加熱
回流8～12小時，抽濾，用乙醚淋洗，得到雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針。
3.根據(jù)權利要求2所述的雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針的合成方法，
其特征在于：在合成兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺丹磺酰衍生物步驟(2)中，
所述的兩端叔丁氧羰基保護的二乙烯三胺、丹磺酰氯、三乙胺按摩爾比為1～1.3:1:
2.5～3。
4.根據(jù)權利要求2所述的雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針的合成方法，
其特征在于：在合成兩端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物步驟(4)中，所述的兩端
氨基的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、溴乙酰溴、三乙胺按摩爾比為1:3～3.5:25～27。
5.根據(jù)權利要求2所述的雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針的合成方法，
其特征在于：在合成雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針步驟(5)中，所述的
兩端溴的二乙烯三胺丹磺酰衍生物、N-甲基咪唑按摩爾比為1:4～5。
6.權利要求1的雙咪唑丹磺酰衍生物陽離子型熒光探針在檢測氨基酸中的用
途，所述的氨基酸為天冬氨酸或谷氨酸。