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黑青斑河鲀干擾素IFNγ2及其制備方法和應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-08
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201110064446.7 
  • 技術(專利)名稱 黑青斑河鲀干擾素IFNγ2及其制備方法和應用 
  • 項目單位 中山大學
  • 發明人 盧丹琪,張旭,貝錦新,陳潔琳,汪婷,張勇,林浩然 
  • 行業類別 健康用品-營養保健品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 韓凌悅
  • 發布時間 2021-12-08  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種黑青斑河鲀干擾素蛋白IFNγ2,其氨基酸序列如SEQIDNO:1所示,該蛋白的編碼基因,核苷酸序列如SEQIDNO:2所示,編碼基因的制備方法,是用序列用SEQIDNO:4和SEQIDNO:5序列為引物克隆得到干擾素蛋白IFNγ2的編碼基因;同時還公開了干擾素蛋白IFNγ2的制備方法,是將黑青斑河鲀干擾素IFNγ2的編碼基因克隆至表達載體,得到重組表達質粒,轉化大腸桿菌,培養轉化的大腸桿菌,經誘導后收集菌體,純化、酶切,得到黑青斑河鲀干擾素IFNγ2。本發明的黑青斑河鲀干擾素IFNγ2可以用于制備魚類免疫調節添加劑或免疫佐劑,具有誘導魚類免疫基因表達的作用。
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  • 02

    說明書

    1.一種黑青斑河鲀干擾素IFNγ2,其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。2.權利要求1所述黑青斑河鲀干擾素IFNγ2的編碼基因,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。3.權利要求2所述黑青斑河鲀干擾素IFNγ2的編碼基因的制備方法,其特征在于以黑青斑河鲀總mRNA為模板,以RNA?Oligo?dT,其序列如SEQ?ID?NO:3為引物,進行反轉錄,得到cDNA;再以cDNA為模板,設計上游引物SEQ?ID?NO:4,下游引物SEQ?ID?NO:5,進行PCR,得到權利要求2所述黑青斑河鲀干擾素IFNγ2的編碼基因。4.權利要求1所述黑青斑河鲀干擾素IFNγ2的制備方法,是將黑青斑河鲀干擾素IFNγ2的編碼基因克隆至表達載體,得到重組表達質粒,轉化大腸桿菌,培養轉化的大腸桿菌,經誘導后收集菌體,純化、酶切,得到黑青斑河鲀干擾素IFNγ2。5.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于所述表達載體為大腸桿菌表達載體pET32a,重組表達質粒的構建包括以下步驟:以含黑青斑河鲀干擾素IFNγ2編碼基因的質粒為模板,設計上游引物SEQ?ID?NO:6,下游引物SEQ?ID?NO:7進行PCR,PCR產物克隆到pET32a上,得到重組表達質粒。6.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于所述培養轉化的大腸桿菌的培養條件為含氨芐青霉素LB液體培養基,30℃,250rpm振蕩培養過夜,再接種到37℃預熱的含氨芐青霉素?TB液體培養基中,培養至OD600達到0.6。7.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于所述誘導為加入IPTG至終濃度為0.5mmol/L,誘導時間為7小時。8.根據權利要求4所述的制備方法,其特征在于所述酶切是用rEK酶。9.權利要求1所述黑青斑河鲀干擾素IFNγ2在制備上調ISG15?mRNA基因表達水平的制劑中的應用。
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專利技術附圖

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