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超高效液質聯用檢測腦微透析液中11種神經遞質的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-27
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201810986389.X 
  • 技術(專利)名稱 超高效液質聯用檢測腦微透析液中11種神經遞質的方法 
  • 項目單位 上海中醫藥大學
  • 發明人 潘凌云,賈益群,王雨,劉新華 
  • 行業類別
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 鄭北城
  • 發布時間 2021-09-27  
  • 01

    項目簡介

    本發明屬于分析化學領域,具體涉及超高效液質聯用檢測腦微透析液中11種神經遞質的方法,步驟包括:腦微透析液用乙腈?水溶液或乙腈?甲酸水溶液稀釋配制的腦微透析樣本液,用超高效液相色譜?質譜/質譜進行定性和/或定量檢測。該方法只需對腦微透析液進行簡單稀釋,即可通過超高效液相色譜?質譜/質譜系統一次實現11種神經遞質實時的定性和定量檢測,檢測結果可控、準確、穩定,方法使用性良好,且分析時間短。克服因神經遞質種類多、神經遞質含量低、基質效應大等導致的檢測方法處理繁瑣、耗時長、準確性低、數據單一等缺陷,具有可預期的臨床應用前景。
    展開
  • 02

    說明書

    1.超高效液質聯用檢測腦微透析液中11種神經遞質的方法,其特征在于,步驟包括:腦微透析液用乙腈-水溶液或乙腈-甲酸水溶液稀釋配制的腦微透析樣本液,用超高效液相色譜-質譜/質譜進行定性和/或定量檢測;超效高液相色譜-質譜/質譜對腦微透析樣本液進行定量檢測時,采用標準曲線法,用溶有11種神經遞質標準品的混合標準樣本液繪制各神經遞質標準品的標準曲線,得到用于定量計算的各神經遞質標準品的回歸方程;所述溶有11種神經遞質標準品的混合標準樣本液以人工腦脊液和乙腈-水溶液或人工腦脊液和乙腈-甲酸水溶液為主要溶劑配制而成,且混合標準樣本液中,人工腦脊液的體積比例恒定;所述的11種神經遞質包括膽堿類神經遞質、氨基酸類神經遞質和單胺類神經遞質,膽堿類神經遞質包括乙酰膽堿;氨基酸類神經遞質包括甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸、天冬氨酸和組胺;單胺類神經遞質包括去甲腎上腺素、5-羥色胺、5-羥吲哚乙酸和多巴胺;超高效液相色譜檢測條件為:UPLC親水作用色譜柱,柱溫30℃~40℃,以乙腈-0.2%甲酸水為流動相的梯度洗脫程序為:(1)體積比例為75%~80%的乙腈等度洗脫1~1.5min;(2)乙腈體積比例從75%~80%勻速降至35%~40%梯度洗脫1.8~2.2min;(3)體積比例為35%~40%的乙腈等度洗脫0.8~1min;(4)乙腈體積比例從35%~40%瞬時切換至75%~80%后等度洗脫0.9~1.2min。2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,腦微透析樣本液中,腦微透析液與乙腈-水溶液或乙腈-甲酸水溶液的體積比為1:1.5~4;乙腈-水溶液或乙腈-甲酸水溶液中,乙腈與水或者甲酸水的體積比為1~6:1,甲酸水中甲酸的體積分數為0.1%~1%。3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,人工腦脊液為包含氯化鈣、十二水合磷酸氫二鈉、六水合氯化鎂、氯化鉀和氯化鈉的pH=7.3~7.4水溶液,氯化鈣、十二水合磷酸氫二鈉、六水合氯化鎂、氯化鉀和氯化鈉的摩爾比為1:1.6:0.8:2.25:121,氯化鈣的摩爾濃度為1.2mmol·L-1;或者包含氯化鈣、氯化鉀、氯化鈉的水溶液,氯化鈣、氯化鉀、氯化鈉的摩爾比為1:1.3:49,氯化鈣的摩爾濃度為2.97mmol·L-1;或者包含氯化鈣、氯化鎂、氯化鉀、氯化鈉的水溶液,氯化鈣、氯化鎂、氯化鉀、氯化鈉的摩爾比為1:0.71:2.25:122,氯化鈣的摩爾濃度為1.2mmol·L-1。4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述溶有11種神經遞質標準品的混合標準樣本液中,人工腦脊液與混合標準樣本液中其余溶液的體積比為1:1.5~4;乙腈-水溶液或乙腈-甲酸水溶液中,乙腈與水或者甲酸水的體積比為1~6:1,甲酸水中甲酸的體積分數為0.1%~1%。5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,還包括腦微透析樣本液離心所取上清液,用于超高效液相色譜-質譜/質譜的定性和/或定量檢測。6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,以乙腈-0.2%甲酸水為流動相的梯度洗脫程序為:0-1.2min:78%乙腈;1.2-3.2min:78%乙腈→40%乙腈;3.2-4.0min:40%乙腈;4.0-5.0min:78%乙腈。7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,質譜檢測條件為,離子源為電噴霧離子源,掃描模式為正離子模式;離子源噴霧電壓:5.5kV;離子源氣簾氣:206.8~275.8kPa;碰撞氣:41.4~55.1kPa;離子源溫度:500℃~600℃;霧化氣:379.2~448.2kPa;輔助氣:379.2~448.2kPa;多反應監測模式。
    展開

專利技術附圖

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