本發明公開了一種檢測表皮生長因子的電化學免疫傳感器及其制備方法。該傳感器由下至上依次由玻碳電極、修飾層a、修飾層b和修飾層c組成；其中，修飾層a為由式Ia或式Ib所示聚多巴胺構成的膜：式Ia和式Ib中，n均為1000-15000；修飾層b由表皮生長因子和谷胱甘肽構成，且所述表皮生長因子和谷胱甘肽均粘附于所述修飾層a上；修飾層c由表皮生長因子抗體修飾的納米銀溶膠制得。本發明通過表皮生長因子與其抗體的特異免疫識別反應，可構筑檢測表皮生長因子的電化學免疫傳感器。該傳感器靈敏度良好、線性范圍較寬，檢出限低達0.2nmol/L，并有望用于實際樣品中表皮生長因子的檢測。式Ia式Ib。

1.一種檢測表皮生長因子的電化學免疫傳感器，由下至上依次由電極、修飾層a、
修飾層b和修飾層c組成；
其中，所述電極為玻碳電極；
所述修飾層a為由式Ia或式Ib所示聚多巴胺構成的膜：

所述式Ia和式Ib中，n均為1000-15000；
所述修飾層b由表皮生長因子和谷胱甘肽構成，且所述表皮生長因子和谷胱甘肽
均粘附于所述修飾層a上；
所述修飾層c由表皮生長因子抗體修飾的納米銀溶膠制得。
2.根據權利要求1所述的傳感器，其特征在于：所述表皮生長因子抗體修飾的
納米銀溶膠中，表皮生長因子抗體修飾的納米銀顆粒的粒徑為50-100nm。
3.根據權利要求1或2所述的傳感器，其特征在于：所述表皮生長因子抗體修
飾的納米銀溶膠為按照包括如下步驟的方法制備而得：
1)將巰基乙酸和納米銀溶膠于pH值為中性的條件下反應10-30min，得到巰基乙
酸修飾的納米銀溶膠；
2)于pH值為5-6的條件下，將步驟1)所得巰基乙酸修飾的納米銀溶膠、EDC
的水溶液和NHS的水溶液混合攪拌10-30min，得到活化的納米銀溶膠；
3)將步驟2)所得活化的納米銀溶膠與表皮生長因子抗體于搖床中振蕩1-4h，調
節體系的pH值至中性，得到所述表皮生長因子抗體修飾的納米銀溶膠。
4.根據權利要求3所述的傳感器，其特征在于：所述步驟1)納米銀溶膠中，納
米銀顆粒的粒徑為20-50nm；
所述反應步驟中，時間為15min；
所述納米銀溶膠為按照包括如下步驟的方法制備而得：將NaBH₄的水溶液與
AgNO₃的水溶液于冰水浴中進行反應5-20min，反應完畢而得；
所述NaBH₄的水溶液的濃度為1×10^-3mol/L-5×10^-3mol/L；
所述AgNO₃的水溶液的濃度為0.5×10^-3mol/L-3×10^-3mol/L；
所述步驟2)中，EDC的水溶液和NHS的水溶液的濃度均為1×10^-3mol/L-5×10^-3
mol/L；EDC的水溶液和NHS的水溶液的體積比為1：1；所述EDC和NHS的摩爾比
為0.5mmol：0.5mmol；
所述步驟3)振蕩步驟中，時間為2小時。
5.根據權利要求4所述的傳感器，其特征在于：納米銀溶膠的制備方法中NaBH₄
的水溶液與AgNO₃的水溶液的冰水浴反應時間為10min；
所述NaBH₄的水溶液的濃度為2×10^-3mol/L；
所述AgNO₃的水溶液的濃度為1×10^-3mol/L；
所述NaBH₄的水溶液與AgNO₃的水溶液的體積比為4：1；
所述步驟2)中，EDC的水溶液和NHS的水溶液的濃度均為2×10^-3mol/L。
6.一種制備權利要求1-5任一所述檢測表皮生長因子的電化學免疫傳感器的方法，
包括如下步驟：
1)將所述電極浸泡于多巴胺的tris緩沖溶液中浸泡30min后，用二次水洗滌并浸
泡，于空氣靜置晾干8h后，在所述電極表面得到所述修飾層a；
2)將步驟1)所得電極于EGF的水溶液中浸泡30min后，再于GSH的PBS緩
沖液中浸泡30min，即在所述修飾層a上得到所述修飾層b；
3)將步驟2)所得電極浸泡于權利要求3所述表皮生長因子抗體修飾的納米銀溶
膠中孵育1h，得到所述檢測表皮生長因子的電化學免疫傳感器。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中，多巴胺的tris緩
沖溶液的pH值為8-9，濃度為0.05-0.2mg/ml；
所述步驟2)中，EGF的水溶液的濃度為10μM；所述GSH的PBS緩沖液的pH
值為7.0，濃度為20mg/ml。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中，多巴胺的tris緩
沖溶液的pH值為8.5，濃度為0.1mg/ml。
9.權利要求1-5任一所述檢測表皮生長因子的電化學免疫傳感器在檢測EGF含
量中的應用。