1.一種采用高效液相色譜法同時測定銀杏葉、銀杏葉提取物及其制劑中14種黃酮苷類組分和2種酚酸類組分含量的方法,其中所述制劑不包括舒血寧注射液,其特征在于采用的色譜條件為:固定相是以十八烷基鍵合硅膠為填料的色譜柱;柱溫35℃;洗脫流速為0.3mL/min;流動相A是含質量比為0.1%的甲酸的水溶液;流動相B是甲醇和乙腈的混合溶劑,體積比是1:1;進行梯度洗脫,梯度條件為:
時間(min) A(%) B(%)
0 88 12
8 85 15
10 77 23
15 77 23
16 76 24
25 70 30
26 65 35
34 65 35
35 88 12
采用二極管陣列檢測器,采用280nm紫外波長檢測酚酸類組分,采用360nm紫外波長檢測黃酮苷類組分;其中黃酮苷類組分以蘆丁為內標,酚酸類組分以隱綠原酸為內標;所述方法,步驟如下:(1)對照品儲備液的制備精密稱取原兒茶酸、隱綠原酸、碟豆素、蘆丁、異槲皮苷、槲皮素-3-O-葡萄糖基(1→2)鼠李糖苷、山奈酚-3-O-蕓香糖苷、紫云英苷、大波斯菊苷、水仙苷、異鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、3-O-{2-O-[6-O-(對羥基-反-香豆酰)-葡萄糖基]-鼠李糖基}-槲皮素、槲皮素、3-O-{2-O-[6-O-(對羥基-反-香豆酰)-葡萄糖基]-(1-2)鼠李糖基}-山奈酚、山奈酚、異鼠李素對照品5 mg,分別加甲醇配成濃度為1mg/mL的單一對照品儲備液;(2)樣品制備方法取銀杏葉粉末,精密稱取1g,置于10ml容量瓶中,加70%甲醇溶液至 刻度線,超聲提取30min, 將提取液以14000r/min的速度離心10min,重復兩次,取上清液作為銀杏葉樣品;(3)測定方法量取對照品溶液和供試品溶液各1 μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖;按加校正因子的替代對照品法以峰面積計算,即得各組分的含量;其中相對校正因子的計算方法是將各化合物標準曲線截距校正為零后,斜率之比即為各化合物的校正因子。