1.一種治療婦科疾病藥物制劑鑒別方法,其特征在于:采用薄層鑒別法對黃柏、白花蛇
舌草、蒼術、炙甘草4味藥進行鑒別;其中,
黃柏的鑒別方法如下:
1.1)供試品溶液的制備:取制劑3g,加水20ml溶解,置水浴上蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶
解,作為供試品溶液;
1.2)對照品溶液的制備:取鹽酸小檗堿對照品,加甲醇制成每1ml含lmg的溶液,作為對
照品溶液;
1.3)陰性對照溶液的制備:按處方去除黃柏以外的藥材同法處理,制成陰性對照液;
1.4)薄層層析:按《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB試驗,分別吸取上述3種溶液各5μ
l,分別點樣于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇-冰醋酸-水7:1:2為展開劑,展開,取出,晾干,
置紫外光燈365nm下檢視;供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒
光斑點,陰性液無干擾;
白花蛇舌草的鑒別方法如下:
2.1)供試品溶液的制備:取本品2g,研細,加60%乙醇50mL,冷浸1h,超聲處理1h,濾過,
濾液加活性炭0.4g,80℃保持20min,濾過,濾液在水浴上濃縮至約5mL,用沸程為60-90℃的
石油醚振搖提取2次,每次5mL,分取下層溶液,用醋酸乙酯振搖提取2次,每次5mL,合并醋酸
乙酯提取液,濃縮至1mL,作為供試品溶液;
2.2)對照品溶液的制備:取白花蛇舌草對照藥材5g,加乙醇50mL冷浸1h后超聲處理
30min,濾過,濾液加活性炭0.1g,80℃保持20min,濾過,濾液在水浴上濃縮至約1mL,作為對
照藥材溶液;
2.3)陰性對照液的制備:取缺白花蛇舌草的樣品同供試品溶液法制成陰性對照溶液;
2.4)薄層層析:照薄層色譜法附錄ⅥB試驗,吸取上述3種溶液各5μL,分別點于同一以
羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以氯仿﹣醋酸乙酯4:3為展開劑,展開,取出,晾
干,置紫外光燈365nm下檢視;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色
的斑點,陰性對照試驗結果無干擾;
蒼術的鑒別方法如下:
3.1)供試品溶液的制備:取制劑3g,加正己烷20ml超聲處理30min,濾過,濾液在水浴上
揮干,殘渣加正己烷2ml溶解作為供試品溶液;
3.2)對照品溶液的制備:取蒼術對照藥材2g,加正己烷10ml超聲處理30min,濾過,濾液
在水浴上蒸干,殘渣加正己烷2ml溶解作為對照品溶液;
3.3)陰性樣品溶液的制備:取缺蒼術的樣品同供試品溶液法制成陰性對照溶液;
3.4)薄層層析:照薄層色譜法附錄ⅥB試驗,吸取上述3種溶液各5μL,分別點于同一以
羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以石油醚﹣乙酸乙酯5:2為展開劑,展開,取出,
晾干,置紫外光燈365nm下檢視;供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏
色的斑點,陰性對照試驗結果無干擾;
炙甘草的鑒別方法如下:
4.1)供試品溶液的制備:取制劑5g,研細,加甲醇40mL,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸
干,殘渣加水20mL使溶解,再用水飽和的正丁醇提取2次,每次20ml,合并正丁醇液,用水
20mL洗滌1次,棄去水液,取正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1mL使溶解,作為供試品溶液;
4.2)對照品溶液的制備:取對照藥材3g,加甲醇20ml超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,
殘渣加水20mL使溶解,再用水飽和的正丁醇提取2次,每次20ml,合并正丁醇液,用水20mL洗
滌1次,棄去水液,取正丁醇液蒸干,殘渣加甲醇1mL使溶解,作為對照品溶液;
4.3)陰性樣品溶液的制備:取缺炙甘草的樣品同供試品溶液的制備方法制成陰性樣品
溶液;
4.4)薄層層析:照薄層色譜法附錄ⅥB試驗,吸取上述3種溶液各5μL,分別點于同一硅
膠G薄層板上,以氯仿﹣甲醇-水6.6:3.5:0.5為展開劑,展開,取出,晾干,噴10%硫酸乙醇溶
液,在105℃烘干至斑點顯色清晰置紫外光燈365nm下檢視;供試品色譜中,在與對照藥材色
譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點,陰性對照試驗結果無干擾;
采用高效液相色譜法測定所述黃柏中鹽酸小檗堿的含量,鹽酸小檗堿進樣量在0.408
~1.836μg之間線性關系良好,r=0.9995,平均回收率為97.7%,RSD=1.61%;黃柏中小檗
堿的含量測定方法具體如下:
色譜條件:
色譜柱:AgilentC18,4.6×250mm,5μm;檢測波長:345nm;流速:1.0ml/min;流動相:乙
腈/三乙胺溶液0.05mol/L,用磷酸調PH至3.0,25:75,進樣量:10μL,柱溫為室溫,理論塔板
數按鹽酸小檗堿峰計算不低于3000;
對照品溶液的制備:精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量,加甲醇制成每1ml中約含
0.102mg的溶液,用0.45μm微孔濾膜過濾即得;
供試品溶液的制備:取本品約4g,研細,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇
50ml,稱定重量,超聲處理45分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,
取0.45μm微孔濾膜過濾的續濾液即得;
陰性樣品的制備:按處方的比例和制法,制成缺黃柏的陰性對照樣品取4g,按供試品溶
液的制備方法,制成陰性對照溶液。
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