本發(fā)明具體涉及基于銅納米簇/碳點/精氨酸復合物的撲熱息痛比率熒光傳感器的制備方法。紅熒光銅納米簇CuNCs通過靜電吸附和氫鍵作用與藍熒光碳點CDs結(jié)合，加入精氨酸后形成CuNCs/CDs/精氨酸復合物。加入精氨酸導致CDs藍熒光減弱，再加入撲熱息痛，因其與精氨酸特異性結(jié)合導致精氨酸與CDs分離，CDs藍熒光恢復，精氨酸和撲熱息痛不會引起CuNCs熒光顯著改變。以CuNCs熒光為參比，CDs熒光為響應，擬合CDs/CuNCs熒光發(fā)射峰強度比率I/I與撲熱息痛濃度間的線性關(guān)系，構(gòu)建撲熱息痛比率熒光傳感器。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法操作簡單，比率信號抗干擾能力強，準確性好，靈敏度和選擇性高，可作為一種新穎的比率熒光傳感器用于撲熱息痛的高效檢測。

1.基于銅納米簇/碳點/精氨酸復合物的撲熱息痛比率熒光傳感器的制備方法，其特征
在于，該方法具體包括以下步驟：
(1)CuNCs的制備：用超純水溶解DNA干燥粉末配制DNA溶液，用含3-嗎啉丙烷磺酸與
NaCl的緩沖液稀釋至pH7.5，3-嗎啉丙烷磺酸與NaCl濃度分別為10mM和15mM，向上述DNA混
合溶液中加入抗壞血酸，抗壞血酸最終濃度調(diào)節(jié)至2mM，在室溫和磁力攪拌下，逐滴加入
CuCl₂，CuCl₂最終濃度調(diào)節(jié)至1mM，混合溶液在避光處反應20min，產(chǎn)物溶液采用截留分子量
1000Da透析袋透析，除去未反應實驗原料，將透析袋中溶液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去90％液體，剩
余液體用真空干燥得到CuNCs，在4℃避光條件下儲存或分散在水溶液中制備得到發(fā)紅色熒
光的CuNCs分散液備用，其中CuNCs平均尺寸為1～5nm；
(2)CDs的制備：稱取1.5g脫乙酰殼聚糖，滴加1.5mL乙酸充分混合溶解，再加入3mL聚乙
烯酰胺，充分攪拌10min后加入25.5mL二次蒸餾水稀釋得到均質(zhì)分散液，將此分散液轉(zhuǎn)入聚
四氟乙烯內(nèi)膽的微型高壓反應釜中，在200℃下攪拌反應5h，產(chǎn)物溶液采用截留分子量
1000Da透析袋透析，除去未反應實驗原料，將透析袋中溶液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去90％液體，剩
余液體用真空干燥得到CDs，在4℃避光條件下儲存或分散在水溶液中制備得到發(fā)藍色熒光
的CDs分散液備用，其中CDs平均尺寸為1～5nm；
(3)CuNCs/CDs/精氨酸復合物的制備：在磁力攪拌下，向CuNCs水分散液中逐滴加入CDs
水分散液，形成CuNCs/CDs均質(zhì)混合液，然后向此混合液中逐滴加入精氨酸水溶液，形成均
質(zhì)CuNCs/CDs/精氨酸復合物混合液；
(4)在室溫和磁力攪拌下，向CuNCs/CDs/精氨酸復合物混合液中加入一定量的撲熱息
痛形成均質(zhì)混合液，在避光處孵化5min后測定不同撲熱息痛濃度下均質(zhì)混合液的熒光發(fā)射
光譜，擬合CDs和CuNCs熒光發(fā)射峰強度比率I_CDs/I_CuNCs與撲熱息痛濃度間的線性關(guān)系，構(gòu)建
撲熱息痛比率熒光傳感器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于銅納米簇/碳點/精氨酸復合物的撲熱息痛比率熒光傳感
器的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述的均質(zhì)混合液中CuNCs質(zhì)量濃度為1～10mg mL
^-1，CDs質(zhì)量濃度為1～10mg mL^-1，精氨酸摩爾濃度為1～100μM。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于銅納米簇/碳點/精氨酸復合物的撲熱息痛比率熒光傳感
器的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述的撲熱息痛摩爾濃度的線性檢測范圍為0.01～
500μM，檢測極限為10～50nM。