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一種毛細管電泳檢測凝血酶濃度的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-10-16
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610060354.4 
  • 技術(專利)名稱 一種毛細管電泳檢測凝血酶濃度的方法 
  • 項目單位 常州大學
  • 發明人 王建浩,顧亞琴,柳麗,丁淑敏,付敏麗,吳昊,邱琳,蔣鵬舉 
  • 行業類別
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 陳飆
  • 發布時間 2021-10-16  
  • 01

    項目簡介

    本發明屬于生物分析領域,涉及一種毛細管電泳檢測凝血酶濃度的方法,步驟如下,(1)設計5’端偶聯熒光染料的DNA,形成含有G‐四鏈體結構的DNA熒光探針;(2)將含G‐四鏈體結構的DNA熒光探針與凝血酶混合,經熒光毛細管電泳檢測,計算峰面積比(S/S),擬合得到峰面積比—濃度標準曲線,對照標準曲線計算待測樣品中凝血酶濃度。采用上述技術方案提供的毛細管電泳檢測凝血酶濃度的方法,操作簡單,可重復性高,能方便快捷的檢測出樣品中凝血酶的濃度,進一步拓展了DNA熒光探針在生物分析領域的應用。
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  • 02

    說明書

    1.一種毛細管電泳檢測凝血酶濃度的方法,其特征在于,所述檢測步驟如下:
    (1)選取帶有熒光染料的DNA序列FAM-F29;
    (2)將步驟(1)所述的FAM-F29在濃度均為5mM的Na+、K+鹽溶液下反應24小時,得到濃度
    為2μM的含有G‐四鏈體結構的DNA熒光探針溶液;
    (3)將粉末狀的凝血酶溶解于Tris-HCl緩沖溶液中,稀釋成不同濃度的凝血酶溶液;
    (4)將步驟(2)所述的G-四鏈體結構的DNA熒光探針溶液與等體積的步驟(3)所述的凝
    血酶溶液在37℃恒溫水浴下混合,得到凝血酶與G-四鏈體結構的DNA熒光探針復合物;
    (5)熒光毛細管電泳檢測:將步驟(4)所述的復合物用熒光毛細管電泳檢測,測定復合
    物通過檢測通道峰面積與總的DNA通過檢測通道的峰值面積之比,進行線性擬合,繪制峰面
    積比—濃度的標準曲線,對照標準曲線確定待測樣品中凝血酶濃度。
    2.如權利要求1所述的一種毛細管電泳檢測凝血酶濃度的方法,其特征在于,步驟(1)
    所述的熒光染料為6-FAM或5-FAM中的一種。
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專利技術附圖

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