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一種人尿氫化可的松的檢測方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-07
  • 技術(shù)成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201310242425.9 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種人尿氫化可的松的檢測方法 
  • 項目單位 南京金域醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司
  • 發(fā)明人 程雅婷,趙蓓蓓,李卓陽,葉文杰,何翠紅,倪周,錢俊,余木俊,陳秀如,李梅英,黃惠微 
  • 行業(yè)類別 健康用品-營養(yǎng)保健品
  • 技術(shù)成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 朱良建
  • 發(fā)布時間 2021-09-07  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明實施例提供了一種人尿氫化可的松的檢測方法,所述方法包括:向人的尿液中加入含有尿氫化可的松內(nèi)標(biāo)物的甲醇溶液,充分混勻后離心,提取上層清液,得待測樣品;對所述待測樣品用液相色譜串聯(lián)四級桿質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測;依據(jù)氫化可的松的相對保留時間和氫化可的松定量離子對的豐度比判斷氫化可的松的存在;依據(jù)氫化可的松與對應(yīng)內(nèi)標(biāo)物在內(nèi)標(biāo)曲線上的峰面積比值,計算樣品中的氫化可的松的含量。本發(fā)明實施例檢測方法快速、高效、靈敏度高、特異性強,操作簡單,方法維護簡便。<!--1-->
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種人尿氫化可的松的檢測方法,其特征在于,所述方法包括:
    (1)、向人的尿液中加入含有尿氫化可的松內(nèi)標(biāo)物的甲醇溶液,充分混
    勻后離心,提取上層清液,得待測樣品;
    其中,所述人的尿液與所述甲醇溶液的體積比是1:1;所述上層清液與
    對應(yīng)的原溶液的體積比為1:2;
    (2)、對所述待測樣品用液相色譜串聯(lián)四級桿質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測;
    其中,所述檢測方法采用負(fù)離子模式,掃描方式為多反應(yīng)監(jiān)測離子掃描
    MRM;
    其中,目標(biāo)定量離子對包括氫化可的松定量離子對,目標(biāo)定量離子的多
    反應(yīng)監(jiān)測離子掃描MRM的條件包括:
    氫化可的松的母離子的質(zhì)/荷比為407.2,對應(yīng)的子離子的質(zhì)/荷比為
    331.1;
    其中,所述液相色譜采用梯度模式洗脫,液相色譜條件包括:
    色譜柱:PFP3.5μm2.0×50mm;
    柱溫:55℃;
    進(jìn)樣量:20μ1;
    流速:0.7m1/min;
    流動相:含0.1%甲酸和0.2mmo1/L乙酸銨的水,以及,含0.1%甲酸和
    0.2mmo1/L乙酸銨的乙腈;
    氫化可的松的保留時間為4.18min;
    (3)、依據(jù)氫化可的松的相對保留時間和氫化可的松定量離子對的豐度
    比判斷氫化可的松的存在;
    依據(jù)氫化可的松與對應(yīng)內(nèi)標(biāo)物在內(nèi)標(biāo)曲線上的峰面積比值,計算樣品中
    的氫化可的松的含量;
    其中,所述梯度洗脫的時間和相應(yīng)比例包括:0min,10%A,90%B;
    0.5min,10%A,90%B;0.6min,15%A,85%B;3.0min,15%A,85%B;
    5.0min,32%A,68%B;5.1min,80%A,20%B;5.6min,80%A,20%B;
    5.7min,10%A,90%B;7min,停止;其中,A相為含0.1%甲酸和0.2mmol/L
    乙酸銨的水,B相為含0.1%甲酸和0.2mmol/L乙酸銨的乙腈。
    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述內(nèi)標(biāo)物包括4d-氫化
    可的松。
    3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,所述4d-氫化可的松的保
    留時間為4.19min;
    內(nèi)標(biāo)定量離子對包括4d-氫化可的松定量離子對,內(nèi)標(biāo)定量離子對的多
    反應(yīng)監(jiān)測離子掃描MRM的條件包括:
    4d-氫化可的松定量離子對的母離子的質(zhì)/荷比為411.2,對應(yīng)的子離子的
    質(zhì)/荷比為335.1。
    4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述待測樣品包括干擾物,
    所述干擾物包括皮質(zhì)酮,和/或,強的松龍;
    其中,所述皮質(zhì)酮的保留時間為3.90min;所述強的松龍的保留時間為
    4.33min;
    干擾物定量離子對包括皮質(zhì)酮定量離子對,和/或,強的松龍定量離子
    對;干擾物定量離子對的多反應(yīng)監(jiān)測離子掃描MRM的條件包括:
    皮質(zhì)酮定量離子對的母離子的質(zhì)/荷比為359.4,對應(yīng)的子離子的質(zhì)/荷比
    為329.2;
    強的松龍定量離子對的母離子的質(zhì)/荷比為359.4,對應(yīng)的子離子的質(zhì)/
    荷比為329.2。
    5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或4所述的方法,其特征在于,所述多反應(yīng)監(jiān)
    測離子掃描MRM的條件還包括:


    6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述質(zhì)譜離子源參數(shù)包
    括:
    電離源:電噴霧電離ESI源;
    氣簾氣CUR:45psi;
    加熱氣Gs1:45psi:
    輔助加熱氣Gs2:55psi:
    加熱氣溫度:500℃;
    碰撞氣:高純氮氣,4psi;
    電噴霧針電壓:-4500V。
    7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述離心的條件包括:以
    6000r/min的速度離心5min。
    8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,還包括:依據(jù)干擾物的保
    留時間判斷干擾物的存在。
    展開

專利技術(shù)附圖

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