1.一種檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,包括以下步驟:(1)制備多種維生素標準溶液,包括以下維生素中的至少兩種以上:維生素A醋酸酯、維生素D3、維生素E乙酸酯;采用HPLC-MS/MS檢測標準溶液,得到標準曲線方程;色譜條件如下:色譜柱:C18柱;所述C18柱是:ADME pH 2-10 3μm 2.1 mm I.D.×150mm柱;流動相包括流動相A:甲醇水溶液相,和流動相B:甲酸水溶液相;其中流動相A:甲醇水溶液中甲醇的體積比例大于95%,流動相B:甲酸水溶液中甲酸的含量低于1wt%;采用梯度洗脫,梯度條件:0~2min,流動相A 50~100%;2~9min,流動相A 100%;9~9.5min,流動相A 100~50%;質譜條件為,ESI正離子掃描模式:多反應監測參數:干燥氣溫度325℃,干燥氣流速11L/min,霧化氣壓力45psi,鞘氣溫度300℃,流速9L/min,毛細管電壓4000V,噴嘴電壓500V;(2)稱取樣品,到棕色容量瓶中,加入提取溶液超聲提取10-30min,冷卻定容,離心,用0.22μm有機相濾膜,過濾上機,采用與步驟(1)相同的色譜參數和質譜檢測參數進行分析測試;所述提取溶液是,由提取溶液第一組分和提取溶液第二組分按照25-35:65-75體積比例混合配制而成的溶液;所述提取溶液第一組分是0.03-0.07% 氨水溶液;所述提取溶液第二組分是0.1-0.3% BHT甲醇溶液;(3)根據步驟( 1) 和步驟( 2) 的檢測結果計算得出樣品中的多種維生素的含量。2.如權利要求1所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,其特征在于,標準溶液制備:先用甲醇溶解維生素,配制成質量濃度為1g/L的標準物質儲備溶液,然后稀釋成分標準工作溶液。3.如權利要求2所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,其特征在于,標準儲備溶液中加入0.2wt%BHT。4.如權利要求2所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,其特征在于,稀釋過程中應用的是提取溶液進行稀釋。5.如權利要求1所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,其特征在于,所述提取溶液第一組份是:0.05%氨水溶液;所述提取溶液第二組分是:0.2% BHT甲醇。6.如權利要求5所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,其特征在于,提取溶液第一組份和提取溶液第二組分的體積比為30:70。7.如權利要求1所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,其特征在于,采用梯度洗脫過程中,流動相是:流動相A:含0.01-0.03%氨水的96-99%甲醇水溶液,流動相B :0.01-0.03%甲酸水溶液。8.如權利要求7所述檢測飼料中多種脂溶性維生素的方法,其特征在于,梯度洗脫程序為:流動相A:含0.02%氨水的98%甲醇水溶液,流動相B :0.02%甲酸水溶液,流速為0.3mL/min。
展開