本發(fā)明公開了一種用于檢測(cè)液體中微量蛋白的試劑盒及其操作方法，包括A液和B液，A液和B液均是包含0.1M氯化鈉的0.1M？PBS緩沖液，A液中包含羧基化磁珠，B液中包含羧基化微球，它們均通過碳化二亞胺法偶聯(lián)上根據(jù)蛋白不同抗原決定簇制備的兩個(gè)單克隆抗體。與傳統(tǒng)光波導(dǎo)生物傳感器比較，本案所涉及的試劑盒能夠?qū)崿F(xiàn)重復(fù)利用；本發(fā)明采用的方法，能夠在溶液中快速檢測(cè)出微量的目標(biāo)蛋白分子，過程更簡(jiǎn)單，效率更高，并且能夠高通量的檢測(cè)樣品；通過連接微球，能夠顯著改變光波導(dǎo)免疫傳感器中諧振腔的折射率，提高檢測(cè)靈敏度。

1.一種用于檢測(cè)液體中微量蛋白的試劑盒，其特征在于，包括A液和B
液，其中：
所述A液是包含0.1M氯化鈉的0.1MPBS緩沖液，所述A液中還包含90～
150nm的羧基化的磁珠；所述羧基化的磁珠通過碳化二亞胺法將末端氨基修
飾的目標(biāo)蛋白單克隆抗體鏈接在磁珠上；
所述B液是包含0.1M氯化鈉的0.1MPBS緩沖液，所述B液中還包含90～
150nm的羧基化的微球；所述羧基化的微球通過碳化二亞胺法將末端氨基修
飾的另一抗原決定簇對(duì)應(yīng)的單克隆抗體鏈接在微球上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于檢測(cè)液體中微量蛋白的試劑盒，其特征在
于，所述A液和B液中，PBS緩沖液的pH均為7.3。
3.一種用于非疾病診斷目的的檢測(cè)液體中微量蛋白的試劑盒的操作方
法，其特征在于，包括以下步驟：
1）將光波導(dǎo)免疫傳感器開啟，先通入A液，所述A液是包含0.1M氯化
鈉的0.1MPBS緩沖液，所述A液中還包含90～150nm的羧基化的磁珠；所述
羧基化的磁珠通過碳化二亞胺法將末端氨基修飾的目標(biāo)蛋白單克隆抗體鏈接
在磁珠上；在光波導(dǎo)免疫傳感器的電磁場(chǎng)作用下，所述羧基化的磁珠被吸附
在光波導(dǎo)免疫傳感器的諧振腔外，產(chǎn)生基底光波導(dǎo)信號(hào)值；
2）隨后將待測(cè)樣品與B液等體積混合得到混合液，所述B液是包含0.1M
氯化鈉的0.1MPBS緩沖液，所述B液中還包含90～150nm的羧基化的微球；
所述羧基化的微球通過碳化二亞胺法將末端氨基修飾的另一抗原決定簇對(duì)應(yīng)
的單克隆抗體鏈接在微球上；將所述混合液通入光學(xué)通道，此時(shí)步驟1）中
吸附在諧振腔外的磁珠與混合液中的微球通過待測(cè)樣品中的目標(biāo)蛋白結(jié)合在
一起，以此改變諧振腔的折射率，使諧振腔內(nèi)的光波導(dǎo)信號(hào)值發(fā)生變化；
3）配制至少四個(gè)含不同濃度的目標(biāo)蛋白標(biāo)準(zhǔn)液，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液按步驟1）
和2）的操作方法得到兩個(gè)光波導(dǎo)信號(hào)值，以目標(biāo)蛋白濃度為橫坐標(biāo)，兩次
光波導(dǎo)信號(hào)值差值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；
4）將步驟1）和2）所得待測(cè)樣品的兩次光波導(dǎo)信號(hào)值差值與所述標(biāo)準(zhǔn)
曲線比對(duì)，定量檢測(cè)出待測(cè)樣品中目標(biāo)蛋白的存在及其濃度。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于非疾病診斷目的的檢測(cè)液體中微量蛋白的
試劑盒的操作方法，其特征在于，所述A液和B液中，PBS緩沖液的pH均為
7.3。