1.一種快速檢測醇沉液糖含量的方法,其特征在于,通過以下步驟實現:
(1)醇沉液校正集樣本的獲取
將丹參藥材水煎得到的提取液濃縮至密度大于1.1g/mL,然后邊攪拌邊加入v/v為95%
的乙醇至酒精計測得上清液中乙醇表觀含量v/v為70%,期間不定時吸取不同乙醇表觀含量
的醇沉液,冷藏后得到的上清液為丹參注射液的一次醇沉液校正集樣本,將一次醇沉液回收
乙醇并濃縮到密度大于1.0g/mL,然后再次加入v/v為95%的乙醇至酒精計測得上清液中乙
醇表觀含量v/v為85%,期間不定時吸取不同乙醇表觀含量的醇沉液,冷藏后得到的上清液
為丹參注射液的二次醇沉液校正集樣本;
(2)高效液相色譜法測定醇沉液校正集樣本的果糖、葡萄糖和蔗糖含量
色譜條件:色譜柱為Waters?carbohydrate高效糖柱,250mm×4.6mm?i.d.,4μm,流動相
為乙腈∶水為86∶14,流速為0.8mL/min,柱溫為30℃,進樣量為20μL,檢測器:蒸發光散
射檢測器,漂移管溫度為90℃,霧化氣為高純氮氣,霧化氣流速為2L/min,增益為1;
對照品溶液的制備:取D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖對照品,精密稱定,分別加水制成每1
mL含D-果糖60mg、D-葡萄糖50mg和蔗糖100mg的溶液,作為對照品儲備液,分別量取
各對照品溶液,加水稀釋制成每1mL含D-果糖6mg、D-葡萄糖5mg和蔗糖10mg的混合
對照品儲備液1及每1mL含D-果糖0.6mg、D-葡萄糖0.5mg和蔗糖0.5mg的混合對照品
儲備液2,取混合對照品儲備液1和2,分別加流動相稀釋20倍,搖勻,濾過,取續濾液,
即得混合對照品溶液1和2;
供試品溶液的制備:取醇沉液校正集樣本,過濾,量取續濾液加v/v為75%的乙腈稀釋
4倍,混勻,10000rpm離心10min,取上清液,即為供試品溶液;
含量測定:分別精密吸取混合對照品溶液1、2和供試品溶液各20μl,注入液相色譜儀,
記錄色譜圖,按二點法計算丹參注射液醇沉液中果糖、葡萄糖和蔗糖含量,作為參比數據;
(3)紫外掃描得到醇沉液校正集樣本的紫外-可見光譜圖
取丹參醇沉液校正集樣本,過濾,量取續濾液,加水稀釋,混勻,10000rpm離心10min,
取上清液,紫外掃描的光譜區間是190nm~400nm,分辨率為0.1nm-1nm,獲得校正集樣本
數據集;
(4)采用偏最小二乘法或者主成分回歸法構建定量模型
使用Unscramb或者Minitab軟件處理數據,在構建光譜圖和糖含量定量模型時使用的方
法是偏最小二乘法或者主成分回歸法,使用交叉驗證法確定最佳主成分數,當定量模型的相
關系數到0.9以上時,認為模型已經建立完成;
(5)未知樣品中糖含量的快速測定
取未知糖含量的丹參注射液第一次醇沉或第二次醇沉工藝過程中獲取的醇沉上清液,加
水稀釋,混勻后10000rpm離心10min,取上清液進行紫外掃描,將光譜數據代入構建的定
量模型中,作為預測集,就可得到未知樣品中果糖、蔗糖或者葡萄糖的含量。
2.根據權利要求1所述的一種快速檢測醇沉液糖含量的方法,其特征在于,步驟(3)
所述的校正集樣本過濾,續濾液加水稀釋的倍數為1000-25000。
3.根據權利要求1所述的一種快速檢測醇沉液糖含量的方法,其特征在于,步驟(3)
所述的校正集樣本數據集為紫外光譜掃描三次之后的平均值。
4.根據權利要求1所述的一種快速檢測醇沉液糖含量的方法,其特征在于,步驟(5)
測定未知樣品中糖含量時樣品的稀釋倍數、紫外光譜掃描的光譜范圍、分辨率參數設置均與
校正集樣品時相同。
5.根據權利要求1所述的一種快速檢測醇沉液糖含量的方法在丹參注射液醇沉工藝過
程中測定醇沉液糖含量中的應用,所述糖為果糖、蔗糖或葡萄糖。
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