1.甘草中甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)的篩選方法,包括以下工藝過程:1)甘草乙醇提取物(LF)用水懸濁后使用乙酸乙酯及正丁醇萃取得到乙酸乙酯層(LE),乙酸乙酯提取部(LE)利用硅(silica)柱層析,依次使用氯仿5.5L,氯仿-甲醇97:3、1.5L,?氯仿-甲醇95:5、4L,?氯仿-甲醇93:7、5L,?氯仿-甲醇9:1、5L和氯仿-甲醇-水60:20:3、4L,?氯仿-甲醇-水60:29:6、4L,?氯仿-甲醇-水6:4:1、4.5L系統進行梯度洗脫,每個分離部位500mL共得到67個分離部位,依照硅膠薄層層析結果進行合并,得到14個分離部位LE1-14;在1mg/mL濃度下進行a-葡萄糖苷酶抑制活性測定,LE8活性最強;2)甘草黃酮分離部位LE8利用反相ODS硅膠柱層析,使用甲醇-水70:30、500mL和甲醇500mL系統進行洗脫,分別得到分離部位LE81和LE82;兩分離部位分別在1mg/mL濃度評價了其對a-葡萄糖苷酶的抑制活性,分離部位LE81抑制活性較強;甘草黃酮分離部位LE81利用JASCO?PU-1580高效液相色譜儀,?Shodex?RI-71示差檢測器,?Waters?X-Bridge?ODS制備柱,流速為5mL/min,流動相甲醇-0.06%三氟乙酸70:30,v/v,使用甲醇-水,含0.06%三氟乙酸,進行洗脫,得到9個分離部位LE811-819;各分離部位分別在1mg/mL濃度評價了其對a-葡萄糖苷酶的抑制活性;分離部位LE818抑制活性最強;?3)通過核磁共振法確定了LE818的結構,為化合物glycyrrhisoflavone,其分子式為:C
20H
18O
6,化學結構式為:
![]()
。2.甘草中甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)的提取方法,其工藝過程為:將甘草乙醇提取物用水混懸后加入乙酸乙酯提取,乙酸乙酯層上硅(silica)柱層析,用氯仿-甲醇95:5洗脫,根據硅膠薄層層析結果將含有甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)的部分進行合并,旋干后得固體;利用JASCO?PU-1580高效液相色譜儀,?Shodex?RI-71示差檢測器,Waters?X-Bridge?ODS?柱制備柱,流速為5mL/min,流動相甲醇-0.06%三氟乙酸70:30,v/v,使用甲醇-水,含0.06%三氟乙酸,進行洗脫制備,根據高效液相色譜儀檢查結果,得到含有甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)的部分,再利用HP-20大孔樹脂柱用30%甲醇洗脫至洗脫液呈中性,除去三氟乙酸,旋干后得到甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)。3.甘草中甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)的提取方法,將甘草乙醇提取物上HP-20大孔樹脂柱,依次用甲醇-水70:30、甲醇-水90:10、甲醇各1000ml洗脫,根據高效液相色譜儀檢查結果90%甲醇部分含有甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone),旋干得固體,將HP-20大孔樹脂柱所得樣品上silica柱層析進一步分離,用氯仿-甲醇95:5洗脫,根據硅膠薄層層析結果將含有甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)的部分進行合并,旋干后得固體,利用JASCO?PU-1580高效液相色譜儀,?Shodex?RI-71示差檢測器,Waters?X-Bridge?ODS?柱制備柱,流速為5mL/min,流動相甲醇-0.06%三氟乙酸70:30、v/v,使用甲醇-水,含0.06%三氟乙酸,進行洗脫制備,根據高效液相色譜儀檢查結果,得到含有甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)的部分,再利用HP-20大孔樹脂柱用30%甲醇洗脫至洗脫液呈中性除去三氟乙酸,旋干后得到甘草異黃酮(glycyrrhisoflavone)。