本發明涉及一種酶協同制備高純度低聚半乳糖的方法，將乳糖加水加熱溶解，調節pH值在4.5-7.0；向乳糖溶液加入β-半乳糖苷酶A和β-葡萄糖苷酶B，先在50～70℃下轉化10～30min，然后在35～55℃條件下保持4～24h；滅酶活，冷卻至室溫，向滅酶后糖液中加入耐高滲釀酒酵母35℃條件下反應12～24h；產物脫色、離子交換、濃縮、噴霧干燥得高純度低聚半乳糖。本發明同時加入兩種酶產低聚半乳糖純度顯著提高低聚半乳糖的含量，降低乳糖含量。

1.一種酶協同制備高純度低聚半乳糖的方法，其特征是，包括步驟如下：（1）將乳糖加水加熱溶解，調節pH值在4.5-7.0；（2）向乳糖溶液加入β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶，β-半乳糖苷酶與β-葡萄糖苷酶的酶活力控制在1~50:1，先在50~70℃下轉化10~30min，然后在35~55℃條件下保持4~24h；（3）滅酶活，冷卻至室溫；（4）耐高滲釀酒酵母的制備：取少量滅酶后糖液，接入安琪耐高溫酵母培養；（5）向剩余滅酶后糖液中加入耐高滲釀酒酵母30~40℃條件下反應12~48h；（6）產物脫色、離子交換、濃縮、噴霧干燥得高純度低聚半乳糖。2.根據權利要求1所述的一種酶協同制備高純度低聚半乳糖的方法，其特征是，步驟（1）乳糖質量濃度控制在30%~60%。3.根據權利要求1所述的一種酶協同制備高純度低聚半乳糖的方法，其特征是，β-半乳糖苷酶的加入量與乳糖溶液的比例為1~20U/g，β-葡萄糖苷酶的加入量與乳糖溶液的比例為0.2-20U/g。4.根據權利要求1所述的一種酶協同制備高純度低聚半乳糖的方法，其特征是，步驟（2）為加β-葡萄糖苷酶，50~70℃轉化10~30min，然后加入β-半乳糖苷酶于35-55℃條件下保持4~24h。5.根據權利要求1所述的一種酶協同制備高純度低聚半乳糖的方法，其特征是，步驟（4）所述的耐高滲釀酒酵母的具體制備方法為：取少量滅酶后糖液，按照1:2體積比分為兩份-I液和II液，將I液稀釋1倍，接入稀釋后I液質量0.2%~1%的安琪耐高溫酵母，32℃培養2~6h后轉入II液中，34~37℃培養6~8h。6.根據權利要求1所述的一種酶協同制備高純度低聚半乳糖的方法，其特征是，步驟（5）所述耐高滲釀酒酵母的加入量為剩余滅酶后糖液質量的0.1%~10%。