本發明公開了一種醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法。該方法采用液相色譜分析技術，借助一測多評方法，能以莪術二酮單一對照品對醒腦靜注射液或其中間體中的9種指標成分同時進行含量測定。該方法檢測靈敏度高，準確性好，能以較低成本對醒腦靜注射液或其中間體的質量進行評價，可解決因待測成分對照品缺乏而無法進行含量測定的問題，有助于更全面地對醒腦靜注射液進行控制質量。

1.一種醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法，其特征在于，包括以
下步驟：
(1)供試品溶液的制備
直接將醒腦靜注射液或其中間體作為供試品溶液進行分析；
(2)對照品溶液的制備
分別精密稱取異佛爾酮、4-亞甲基-異佛爾酮、莪術雙環烯酮、莪術烯醇、莪術二酮、莪
術酮、莪術呋喃二烯酮、莪術醇、吉馬酮9種成分的對照品適量，分別用質量分數為30～
100％的甲醇水溶液溶解并定容，制成具有已知濃度的各指標成分的單一對照品儲備液；
再分別精密吸取各成分的單一對照品儲備液適量，混合后加質量分數為10～50％的甲
醇水溶液稀釋得到適宜濃度的混合對照品溶液，備用；
(3)相對校正因子的測定
取步驟(2)制備的混合對照品溶液，注入高效液相色譜儀，得到混合對照品溶液中莪術
二酮和其他各待測成分的峰面積，以莪術二酮為內參物，以相對校正因子計算公式f_x/s＝
f_x/f_s＝(m_x×A_s)/(m_s×A_x)分別計算異佛爾酮、4-亞甲基-異佛爾酮、莪術雙環烯酮、莪術烯
醇、莪術酮、莪術呋喃二烯酮、莪術醇和吉馬酮8種成分對莪術二酮的相對校正因子，
式中，f_s為莪術二酮的校正因子，f_x為除莪術二酮以外的某一待測成分的校正因子，m_s
是混合對照品溶液中莪術二酮的進樣質量，A_s是混合對照品溶液中莪術二酮進樣質量為m_s
時測得的峰面積，m_x是混合對照品溶液中除莪術二酮以外的某一待測成分的進樣質量，A_x是
混合對照品溶液中除莪術二酮以外的某一待測成分進樣質量為m_x時測得的峰面積；
(4)樣品中多指標成分的測定
精密吸取供試品溶液，注入高效液相色譜儀，得到供試品溶液中各待測成分的峰面積，
供試品溶液中莪術二酮的進樣質量m_s’由莪術二酮單一對照品溶液以外標定量法測定得
到，供試品溶液中除莪術二酮以外的其他某一待測成分的進樣質量m_x’由公式m_x’＝f_x/s×
m_s’×(A_x’/A_s’)計算得到，
式中，A_s’和A_x’分別是供試品溶液中測得的莪術二酮和除莪術二酮以外的其他某一待
測成分的峰面積，f_x/s是步驟(3)測得的異佛爾酮、4-亞甲基-異佛爾酮、莪術雙環烯酮、莪術
烯醇、莪術酮、莪術呋喃二烯酮、莪術醇和吉馬酮8種成分對莪術二酮的相對校正因子；
供試品溶液中各待測成分的濃度由測定或計算得到的進樣質量m_s’和m_x’經換算得到；
所述測定方法中，高效液相色譜儀測定的條件為：色譜柱：反相C₁₈色譜柱；流動相：A相
為磷酸水溶液，B相為乙腈；洗脫程序為線性梯度洗脫；流速：0.5～0.7mL/min；柱溫：35～45
℃；
所述的洗脫程序中，磷酸水溶液占流動相體積比為：0min，28～32％；10min，53～57％；
24min，53～57％；24.1min，68～72％；35min，68～72％；40min，98～100％。
2.根據權利要求1所述的醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法，其
特征在于，所述測定方法中，高效液相色譜儀的檢測波長：異佛爾酮，238nm±2nm；4-亞甲
基-異佛爾酮，275nm±2nm；莪術雙環烯酮，256nm±2nm；莪術烯醇，261nm±2nm；莪術二酮，
220nm±2nm；莪術酮，274nm±2nm；莪術呋喃二烯酮，274nm±2nm；莪術醇，210nm±2nm；吉馬
酮，210nm±2nm。
3.根據權利要求1所述的醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法，其
特征在于，所述的流動相中，磷酸水溶液的質量分數為0.05～0.2％。
4.根據權利要求1所述的醒腦靜注射液或其中間體中多指標成分含量的測定方法，其
特征在于，步驟(3)中，異佛爾酮、4-亞甲基-異佛爾酮、莪術雙環烯酮、莪術烯醇、莪術酮、莪
術呋喃二烯酮、莪術醇、吉馬酮與莪術二酮間的相對校正因子分別為0.177±0.01、0.208±
0.01、0.497±0.01、0.602±0.01、1.59±0.05、0.768±0.02、0.790±0.05、0.275±0.01。