本發明公開了一種卡巴膽堿原料藥、卡巴膽堿制劑中卡巴膽堿及雜質含量的高效液相色譜檢測方法，采用親水相互作用色譜體系進行分離，采用蒸發光散射、示差折光檢測器或者質譜檢測器進行檢測，按外標法以峰面積的常用對數值與進樣量的常用對數值作線性回歸計算樣品中卡巴膽堿及其雜質的含量。本發明的檢測方法能夠將卡巴膽堿及在卡巴膽堿原料產品中或者卡巴膽堿制劑中所含雜質如氯化膽堿和氯化乙酰膽堿有效分離，從而實現精確測定卡巴膽堿原料藥與制劑中卡巴膽堿的含量及其雜質的含量，靈敏度高、重現性良好，適用于卡巴膽堿原料藥、卡巴膽堿注射液、卡巴膽堿滴眼液、卡巴膽堿眼內注射溶液的質量控制。

1.一種卡巴膽堿及其雜質含量的液相色譜檢測方法，其特征在于，包括下述步驟：（1）對照品溶液制備???取對照品卡巴膽堿、氯化膽堿、氯化乙酰膽堿適量加體積比70:30的乙腈-水制成每1ml各含1mg的溶液，搖勻，過0.45mm微孔濾膜，取續濾液作為對照品溶液；（2）供試品溶液制備取卡巴膽堿原料藥或者卡巴膽堿制劑適量，加體積比70:30的乙腈-水制成每1mL含1mg卡巴膽堿的溶液，用0.45μm微孔濾膜，取續濾液作為供試品溶液；（3）液相色譜分離色譜條件如下：色譜柱：酰胺基鍵合的硅膠色譜柱；色譜柱內徑4.6mm，色譜柱長度250mm，填充物粒徑5μm；流動相：乙腈：醋酸銨水溶液（v/v）=70:30，醋酸銨水溶液濃度為40mmol/L；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；采用蒸發光散射器進行檢測，蒸發光散射器的漂移管溫度為80℃，以高純氮氣作為霧化氣，流速為1.6L/min；（4）濃度計算方法和檢測限按外標法以峰面積的常用對數值與進樣量μg的常用對數值作線性回歸計算樣品中卡巴膽堿及其雜質的含量。