1.一種群勃龍殘留快速檢測試紙卡，其特征在于：所述的群勃龍殘留快速檢測試紙卡
包括塑料盒體和封裝于塑料盒體內的試紙條，所述試紙條的底層為支撐層，該支撐層上由
左到右依次附著有緊密相連的樣品墊、金標抗體結合墊、硝酸纖維素膜和吸收墊，所述的塑
料盒體上開有加樣孔和觀察窗，該加樣孔的位置與試紙條上的樣品墊位置相對應，觀察窗
與試紙條上的硝酸纖維素膜位置相對應，所述的硝酸纖維素膜上有群勃龍－雞卵清白蛋白
偶聯物溶液印制的檢測線和羊抗鼠IgG溶液印制的質控線，所述群勃龍-雞卵清白蛋白偶聯
物的制備方法為：混合酸酐法將37.2mgTRE琥珀酸酯溶解在2mlN,N-二甲基甲酰胺
（DMF）中，置4℃冰箱中預冷10min，然后于冰浴磁力攪拌下，加入10μl三乙胺，4℃冰浴條
件下反應1h，然后加入30μl氯甲酸異丁酯，繼續冰浴攪拌反應1h，將40mg的OVA溶于2
mlpH9.6濃度為0.05mol/L的碳酸鹽緩沖溶液，冰浴、攪拌下將上述反應產物逐滴加入
OVA溶液中，加完后在4℃下振蕩反應6h，反應產物充分透析，即得TRE-OVA包被抗原溶液，
將其冷凍干燥保存備用，所述的金標抗體結合墊上灌注有膠體金標記的抗群勃龍特異性單
克隆抗體，該金標抗體結合墊的制備方法為：將玻璃纖維棉裁成4mm寬的細條，放入含有質
量濃度為5%的BSA、質量濃度為2%的蔗糖、質量濃度為0.8%的NaCl和質量濃度為0.05%的
NaN3的磷酸鹽緩沖液中20min，37℃恒溫烘干，然后將膠體金標記的抗群勃龍特異性單克隆
抗體灌注到已處理好的玻璃纖維棉上，真空凍干4h，即制得金標抗體結合墊，其中膠體金標
記的抗群勃龍特異性單克隆抗體是由群勃龍-牛血清白蛋白偶聯物免疫Balb/C小鼠制備而
來的，所述的群勃龍-牛血清白蛋白偶聯物TRE-BSA的制備過程具體包括以下步驟：
（1）半抗原衍生化：稱取TRE100mg溶于10ml無水吡啶，然后加入180mg的琥珀酸酐，50
℃避光攪拌反應24h，反應產物用氮吹儀濃縮，獲得淡黃色膏狀物，用質量濃度為5%的
NaHCO3溶液溶解后，乙醚萃取，H2SO4酸化，離心后棄上清，殘余物用無水硫酸鈉干燥，重結晶
得TRE琥珀酸酯；
（2）免疫原的合成：采用碳化二亞胺EDC法合成TRE免疫原，首先將37.2mgTRE琥珀酸酯
用2mlN,N–二甲基甲酰胺攪拌溶解后，加入12mgN-羥基琥珀酰亞胺NHS和38mgEDC，37℃
條件下避光，搖床振蕩反應24h，離心后取上清液逐滴加入到3ml含66mgBSA、摩爾濃度為
0.01mol/L、pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液PBS中，37℃條件下避光振蕩反應4h，反應完成后先用
蒸餾水透析2d，再用PBS透析3d，紫外掃描透析液無小分子吸收峰時分裝于安瓿瓶中，-20℃
保存。
2.根據權利要求1所述的群勃龍殘留快速檢測試紙卡，其特征在于所述樣品墊的制備
方法為：將玻璃纖維棉用含有質量濃度為2%的BSA、質量濃度為1%的蔗糖、質量濃度為0.5%
的硼酸鈉和質量濃度為0.1%的NaN3的PBS緩沖液處理后，干燥備用，即為樣品墊。
3.根據權利要求1所述的群勃龍殘留快速檢測試紙卡，其特征在于所述硝酸纖維素膜
的制備方法為：將硝酸纖維素膜置于X-only單向噴點儀平臺上，包被抗原群勃龍-雞卵清白
蛋白偶聯物放于A池，羊抗鼠IgG放于B池，展平壓緊，開機后將包被抗原和二抗分別點射于
硝酸纖維素膜上，形成檢測線和質控線，室溫自然干燥后，將其浸入封閉液中30min，所述封
閉液為BSA質量濃度為1%、pH值為7.4的PBS緩沖液，37℃烘干后，加入干燥劑，4℃密封保存。
4.根據權利要求1所述的群勃龍殘留快速檢測試紙卡，其特征在于所述吸收墊的制備
方法為：將以植物長纖維為原材料制作的純白濾紙用切割機切成4mm寬的細條，并用膠膜進
行一側封閉，干燥備用，即為吸收墊。
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