本發明提供了一種電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法包括：待預處理后的玻碳電極干燥后，取5μL殼聚糖/硫堇共聚物溶液滴加于干燥后的玻碳電極表面的中心，自然干燥后用超純水反復清洗形成的聚合物膜至洗出水在600nm下無吸光值；取5μL納米金/辣根過氧化物酶溶液滴加于玻碳電極表面的中心，37℃干燥箱干燥20?30min，待干燥后用超純水清洗2?3次；再將玻碳電極置于純化的單克隆抗體溶液中4℃自組裝24h；最后將玻碳電極置于1％的牛血清白蛋白溶液中37℃溫育1h，以封閉非特異性位點，以含體積百分比0.05％Tween?20的PBS溶液清洗未結合的BSA；自然晾干。本發明能夠解決常規制備方法周期較長且靈敏度不高等問題。

1.一種電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法，其特征在于，包括步
驟如下：
(1)玻碳電極預處理，其中，所述玻碳電極用0.03μm粒徑的氧化鋁漿在麂皮上呈8字形
拋光；
(2)待預處理后的玻碳電極干燥后，取5μL殼聚糖/硫堇共聚物溶液滴加于干燥后的玻
碳電極表面的中心，自然干燥后用超純水反復清洗形成的聚合物膜至洗出水在600nm下無
吸光值；
(3)取5μL納米金/辣根過氧化物酶溶液滴加于用超純水反復清洗的玻碳電極表面的中
心，37℃干燥箱干燥20-30min，待干燥后用超純水清洗2-3次；其中，納米金溶膠的制備方法
如下：
取4mL 1％檸檬酸鈉溶液加入到100mL 0.01％氯金酸溶液中混勻，置于微波爐中中火
保持5-10min，反應至溶液成透亮的酒紅色即得納米金溶膠，上述百分數均指的是質量百分
數；
(4)再將所述玻碳電極置于純化的單克隆抗體溶液中4℃自組裝24h；
(5)最后將所述玻碳電極置于質量百分比為1％的牛血清白蛋白溶液中37℃溫育1h，以
封閉非特異性位點，以含體積百分比0.05％Tween-20的PBS溶液清洗未結合的BSA；自然晾
干即得電化學納米免疫傳感器。
2.根據權利要求1所述的電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法，其
特征在于，在步驟(1)中，所述玻碳電極預處理還包括下述過程：
將拋光后的玻碳電極用水清洗后在超聲水浴中清洗數十秒，至表面光滑潔凈，并在1×
10^-3mol/L K₃Fe(CN)₆溶液中用循環伏安法活化電極，重復掃描直至出現穩定的循環伏安曲
線，最后置于氮氣中備用；其中，
所述循環伏安法的掃描范圍為0.6～－0.1V，掃描速度為50mV/s，峰電位差為64mV。
3.根據權利要求1所述的電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法，其
特征在于，在步驟(2)中，所述殼聚糖/硫堇共聚物通過下述方法得到：
首先取0.6mL質量百分比為10％的戊二醛溶液滴加到5mL質量百分比2％的殼聚糖溶液
中混勻，然后加入0.4mL濃度為0.01mol/L硫堇溶液再次混勻，最后再滴加4mL體積百分比
2％的乙酸溶液至總體積為10mL，搖勻后靜置5min至溶液中無氣泡，即得所述殼聚糖/硫堇
共聚物。
4.根據權利要求1所述的電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法，其
特征在于，所述納米金溶膠利用分光光度計對其進行掃描，光吸收性膠體金在可見光范圍
內有一單一光吸收峰，且光吸收峰的波長λ_max在518nm；用透射電鏡對所制納米金溶膠顆粒
的大小、形狀及分散情況進行進一步精確的表征，結果顯示顆粒呈球形，分散均勻，粒徑為
18-20nm。
5.根據權利要求1所述的電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法，其
特征在于，在步驟(3)中，所述納米金/辣根過氧化物酶溶液采用下述方法制備：
用濃度為0.1mol/L K₂CO₃調節所述納米金溶膠的pH值至7.0后，取1mL所述納米金溶膠
與1mL 2.0g/L HRP溶液攪拌混勻，即得所述納米金/辣根過氧化物酶溶液。
6.根據權利要求1所述的電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法，其
特征在于，在步驟(4)中，所述單克隆抗體為Balb/c小鼠腹水純化，且濃度不低于0.5mg/mL。
7.根據權利要求1所述的電化學納米免疫傳感器的通用信號放大系統的制備方法，其
特征在于，在步驟(5)中，所述牛血清白蛋白溶液采用下述方法制備：稱取1g牛血清白蛋白
粉末加到雙蒸水中，混合均勻。