1.一種用于腫瘤病理診斷用途的HAb18G/CD147癌標志物的免疫組織化學
診斷試劑盒,臨床應用于上皮源性惡性腫瘤的輔助診斷或鑒別診斷,
其特征在于,該試劑盒的內容物包括:
1)用于去除人組織切片中內源性酶的阻斷劑,該阻斷劑是由濃度為3
%的過氧化氫溶液和濃度為80%的甲醇溶液組成;
2)用于封閉人組織切片中交叉蛋白反應非特異性染色的非特異性蛋白
封閉劑;該封閉劑是由3-5%正常動物血清與磷酸鹽緩沖液配制而成;
所述的人組織切片為石蠟切片和冰凍切片;
3)與人體癌組織中HAb18G/CD147癌標志物結合的第一抗體;該第一抗
體是特異性結合HAb18G/CD147癌標志物的鼠源性單克隆抗體,其使用
濃度為10-100μg/mL;
所述的第一抗體在10-100μg/mL濃度的抗體保存液中保存,該抗體保
存液包括有1%牛血清白蛋白、0.1%膠原、0.01mol/L磷酸鹽緩沖液、0
.05%?NaN3,該抗體保存液能夠維持第一抗體在2-8℃下保存24個月;
4)能與第一抗體結合的第二抗體;該第二抗體是生物素標記的羊或兔
抗小鼠IgG的多克隆抗體;
5)用來結合第二抗體上生物素的酶標鏈霉親和素;該酶標鏈霉親和素
是辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素,為顯色底物;
6)與顯色底物作用的顯色試劑,該顯色試劑是聯苯二胺(DAB)溶液
、三羥甲基氨基甲烷(Tris·Hcl)緩沖液和去離子水配制而成,以上
三種試劑的配制用量體積比為1:1:50;
7)試劑盒所用的緩沖體系為,磷酸鹽緩沖液Na2HPO4-NaH2PO4-NaCl,
濃度為0.01mol/L,pH為7.2~7.45。
2.權利要求1所述的用于腫瘤病理診斷用途的HAb18G/CD147癌標志
物的免疫組織化學診斷試劑盒在多種癌組織的染色方法,其特征在于
,包括:
人組織切片用水化后,加適量的內源性酶阻斷劑,反應10分鐘,磷酸
鹽緩沖液清洗;滴加非特異性蛋白封閉劑1~2滴,反應10分鐘;滴加第
一抗體1~2滴,37℃反應2小時,磷酸鹽緩沖液清洗;滴加第二抗體1~
2滴,22-28℃反應20分鐘,磷酸鹽緩沖液清洗;滴加酶標鏈酶親和素
1~2滴,22-28℃反應15分鐘,磷酸鹽緩沖液清洗;滴加新鮮配制的顯
色試劑1~2滴,22-28℃反應1~10分鐘,磷酸鹽緩沖液清洗;蘇木素染
核,梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹膠封片、光學顯微鏡觀察;
上述磷酸鹽緩沖液清洗為每次3遍,震蕩清洗5分鐘。
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