本發(fā)明屬于海洋化學(xué)工程技術(shù)，具體涉及一種不同乙酰度的N-乙酰化殼六糖的分離純化方法。首先制備全脫乙酰化殼六糖為原料，將其溶于甲醇/水溶液中，加入一定量的乙酸酐室溫下進(jìn)行乙酰化修飾得到N-乙酰化殼六糖混合物，然后將混合物用離子交換色譜柱CM？Sephadex？C-25或CM？Sepharose？Fast？Flow以0-2M濃度的NaCl溶液在pH3-6，流速為2-5mLmin的條件下進(jìn)行分離純化，收集洗脫液，將洗脫組分分別經(jīng)活性碳萃取脫鹽后濃縮，即得到不同乙酰度N-乙酰化殼六糖，本發(fā)明以全脫乙酰化殼六糖為原料，采用離子交換色譜分離得到六種不同乙酰度的N-乙酰化殼六糖，具有流速快、分辨率高、產(chǎn)率高的特點(diǎn)，而且分離步驟少，只經(jīng)過(guò)一步分離就能夠得到不同乙酰度N-乙酰化殼六糖。

1.一種不同乙酰度的N-乙酰化殼六糖的分離純化方法，其特征在于：將全脫乙酰化殼
六糖進(jìn)行乙酰化后得到N-乙酰化殼六糖混合物，所得N-乙酰化殼六糖混合物溶解后用離子
交換色譜柱以含0-2M濃度的NaCl的緩沖溶液，在pH3-6，2-5mLmin^-1流速下進(jìn)行分離純化，
以糖含量收集含有寡糖的不同組分的洗脫液，將不同組分的洗脫液分別經(jīng)活性炭萃取脫鹽
后濃縮，即得到N-乙酰化殼六糖、N，N′-二乙酰化殼六糖、N，N′，N′′-三乙酰化殼六糖、N，N′，
N′′，N′′′-四乙酰化殼六糖、N，N′，N′′，N′′′，N′′′′-五乙酰化殼六糖、N，N′，N′′，N′′′，
N′′′′，N′′′′′-六乙酰化殼六糖；
所述將全脫乙酰化殼六糖進(jìn)行乙酰化后得到N-乙酰化殼六糖混合物具體為：將全脫乙
酰化殼六糖加入到過(guò)量的甲醇與水混合液中，混勻后再加入乙酸酐在室溫下反應(yīng)15-
240min，反應(yīng)后收集反應(yīng)液冷凍干燥得到固體N-乙酰化殼六糖混合物，待用；其中，全脫乙
酰化殼六糖與乙酸酐的質(zhì)量體積比為1∶0.1-1.5；
所述甲醇與水混合液中甲醇與水按體積比1∶1的比例混合。
2.按權(quán)利要求1所述的不同乙酰度的N-乙酰化殼六糖的分離純化方法，其特征在于：所
述離子交換色譜柱為CMSephadexC-25或CMSepharoseFastFlow。
3.按權(quán)利要求1所述的不同乙酰度的N-乙酰化殼六糖的分離純化方法，其特征在于：所
述N-乙酰化殼六糖混合物于pH＝3-6的酸性溶液中溶解，用孔徑為0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾，
待用。