1.一種檢測三聚氰胺的酶聯(lián)免疫試劑盒,包括半抗原和三聚氰胺的特異性抗
體;所述特異性抗體為所述三聚氰胺的單克隆抗體;所述半抗原的結(jié)構(gòu)式如下:
所述單克隆抗體是由保藏號為CGMCC?No.2716的對三聚氰胺藥物單克隆雜
交瘤細(xì)胞株C-3-4分泌產(chǎn)生的抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于:所述半抗原和三聚氰胺的特
異性抗體以下述任一種形式存在:
1)將所述半抗原與載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián),得到半抗原與載體蛋白的偶聯(lián)物,將
其作為包被原,所述特異性抗體進(jìn)行酶標(biāo)記后作為酶標(biāo)記物;
2)所述特異性抗體為包被原,所述半抗原進(jìn)行酶標(biāo)記后作為酶標(biāo)記物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包括抗抗體;
所述抗抗體為羊抗鼠抗抗體;
所述半抗原和抗抗體以下述任一種形式存在:
1)將所述半抗原與載體蛋白進(jìn)行偶聯(lián),得到半抗原與載體蛋白的偶聯(lián)物,將
其作為包被原,所述抗抗體進(jìn)行酶標(biāo)記后作為酶標(biāo)記物;
2)所述抗抗體為包被原,所述半抗原進(jìn)行酶標(biāo)記后作為酶標(biāo)記物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包括三
聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品溶液、顯色液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液;
所述濃縮洗滌液為pH值為7.8-8.5、含有在所述濃縮洗滌液中的質(zhì)量終濃度為
0.02-0.05%疊氮化鈉、在所述濃縮洗滌液中的質(zhì)量終濃度為1.0-2.0%吐溫-20、
0.1-0.3mol/L的磷酸鹽緩沖液;所述濃縮復(fù)溶液為含有在所述濃縮復(fù)溶液中的質(zhì)量
終濃度為5-10%的DMSO、pH為6.5-6.7、0.1-0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的試劑盒,其特征在于:所述酶標(biāo)記中所用的標(biāo)
記酶為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酯酶;當(dāng)標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶時(shí),所述顯色
液由顯色液A液和顯色液B液組成,顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲,顯色液
B液為鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺,終止液為1-2mol/L硫酸或鹽酸溶液;當(dāng)標(biāo)記酶為
堿性磷酸酯酶時(shí),顯色劑為硝基磷酸鹽緩沖液,終止液為1-2mol/L氫氧化鈉溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒,其特征在于:所述濃縮洗滌液為pH值為8.2、
含有在所述濃縮洗滌液中的質(zhì)量終濃度為0.03%的疊氮化鈉、在所述濃縮洗滌液中
的質(zhì)量終濃度為2.0%的吐溫-20、0.2mol/L磷酸鹽緩沖液;所述濃縮復(fù)溶液為含有在
所述濃縮復(fù)溶液中的質(zhì)量終濃度為8%的DMSO、pH為6.6、0.2mol/L磷酸鹽緩沖液。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒,其特征在于:所述底物顯色液A液為過氧化
脲,所述底物顯色液B液為四甲基聯(lián)苯胺;所述終止液為2mol/L的鹽酸。
8.一種檢測三聚氰胺的方法,包括以下步驟:
1)樣品前處理
當(dāng)所述樣品為牛奶樣品時(shí),所述樣品前處理方法為:將濃縮復(fù)溶液與牛奶混勻,
其中所述牛奶與所述濃縮復(fù)溶液的體積比為1∶8-10,取所述混勻后的樣品用于分
析;
當(dāng)所述樣品為奶粉樣品時(shí),所述樣品前處理方法為:用醋酸緩沖液超聲溶解奶
粉,其中所述醋酸緩沖液與所述奶粉的配比為4-6ml∶0.5-1.5g,離心取上清液,將
所述上清液以1∶8-10的體積比與濃縮復(fù)溶液混勻,取樣用于分析;
當(dāng)所述樣品為飼料時(shí),所述樣品前處理方法為:將乙腈與飼料混勻,其中所述
乙腈與所述飼料的配比為8-12ml∶0.5-1.5g,然后超聲提取8-15min,離心取上清液;
再將所述上清液吹干,加入正己烷,混勻,再加入濃縮復(fù)溶液,其中所述上清液、
所述正己烷與所述濃縮復(fù)溶液的體積比為1∶1∶1,離心取下層水相;將所述下層
水相與所述濃縮復(fù)溶液以1∶8-10的體積比混勻,取樣用于分析;
2)利用權(quán)利要求1-6中任一所述的酶聯(lián)免疫試劑盒檢測1)中所得到的樣品。
9.由保藏號為CGMCC?No.2716的對三聚氰胺藥物單克隆雜交瘤細(xì)胞株C-3-4
分泌產(chǎn)生的三聚氰胺的單克隆抗體。
10.保藏號為CGMCC?No.2716的對三聚氰胺藥物單克隆雜交瘤細(xì)胞株C-3-4。