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一種潑尼松的磁免疫化學發光檢測試劑盒及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-11-02
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201711440343.X 
  • 技術(專利)名稱 一種潑尼松的磁免疫化學發光檢測試劑盒及其應用 
  • 項目單位 北京勤邦生物技術有限公司
  • 發明人 何方洋,萬宇平,朱亮亮,賈芳芳,杜美紅,張穎,楊春艷,馮才偉 
  • 行業類別
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 鄭時安
  • 發布時間 2021-11-02  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供了一種潑尼松的磁免疫化學發光檢測試劑盒,它包括:酶標抗原、酶標抗原稀釋液、磁標抗體、磁標抗體稀釋液、潑尼松系列標準品溶液、化學發光底物A液、化學發光底物B液、復溶液、洗滌液,其中酶標抗原是辣根過氧化物酶標記的潑尼松半抗原,磁標抗體是免疫磁珠標記的潑尼松單克隆抗體。本發明還公開了一種利用上述試劑盒配套化學發光檢測儀檢測牛奶中潑尼松殘留量的方法,本方法對潑尼松檢測具有較高的靈敏度、特異性和較短的檢測時間。
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  • 02

    說明書

    1.一種潑尼松的磁免疫化學發光檢測試劑盒,包括酶標抗原、酶標抗原稀釋液、磁標抗體、磁標抗體稀釋液、潑尼松系列標準品溶液、化學發光底物A液、化學發光底物B液、復溶液、洗滌液;其特征在于:所述酶標抗原是辣根過氧化物酶標記的潑尼松半抗原,所述磁標抗體是免疫磁珠標記的潑尼松單克隆抗體,所述潑尼松單克隆抗體是由潑尼松半抗原與鑰孔血藍蛋白偶聯得到的偶聯物作為免疫原免疫動物制備獲得;所述潑尼松半抗原的合成方法為:取氯潑尼松1.0g,加甲醇溶解,加氫化鈉0.3g,攪拌,混勻,加己二酰肼0.49g,攪拌,70℃反應4h,停止反應,旋蒸,濃縮,加水,乙酸乙酯萃取,無水硫酸鈉干燥蒸干,上硅膠柱,體積比為5:1的石油醚/乙酸乙酯洗脫分離,得到己酰潑尼松半抗原產物1.2g,即為潑尼松半抗原,其分子結構式為: 2.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于:所述免疫磁珠表面含有—OH、—COOH或—NH2活性基團。3.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于:所述化學發光底物A液為含有魯米諾和對甲苯酚的三羥甲基氨基甲烷溶液,化學發光底物B液為含有檸檬酸、無水Na2HPO4和CO(NH2)2·H2O2的水溶液。4.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒配套化學發光檢測儀檢測潑尼松的殘留量。5.一種利用權利要求1-4任一項所述的試劑盒檢測潑尼松的方法,包括下列步驟:1)將酶標抗原與酶標抗原稀釋液按照1:10~1:20的體積比進行稀釋,裝入化學發光檢測儀酶標抗原工作液容器中;2)將磁標抗體與磁標抗體稀釋液按照1:10~1:20的體積比進行稀釋,裝入化學發光檢測儀磁標抗體工作液容器中;3)化學發光檢測儀分別吸取30~60μL酶標抗原工作液、30~60μL待測樣品液和30~60μL磁標抗體工作液,依次加入到反應杯存儲裝置中,室溫下反應15min,再通過清洗裝置進行磁分離2~4min,棄上清液后用洗滌液300~500μL對復合物沉淀清洗3~5次;4)將分離好的復合物放入測量暗箱,加入化學發光底物A液和化學發光底物B液各50μL,檢測發出的相對光強度,樣品中潑尼松的含量與相對光強度成負相關關系,通過相對光強度標準曲線計算潑尼松的殘留量。
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專利技術附圖

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