1.一種中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白檢測試劑盒，由彼此獨立的試劑Ⅰ
和試劑Ⅱ組成；所述試劑Ⅰ的組分包括：生物緩沖劑、表面活性劑、促凝劑、防腐劑、
穩定劑、阻斷劑、螯合劑和水；所述試劑Ⅱ的組分包括：包被中性粒細胞明膠酶相關
脂質運載蛋白抗體的膠乳顆粒、生物緩沖劑、螯合劑、表面活性劑、防腐劑、助懸劑、
封閉劑、穩定劑和水；其特征在于：所述的中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白抗體
既能和中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白抗原結合又能和MMP-9/NGAL復合物相結
合；所述膠乳顆粒為粒徑105-145nm的聚苯乙烯膠乳顆粒經羧化改性得到。
2.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述的中性粒細胞明膠酶
相關脂質運載蛋白抗體通過親和層析方法篩選得到；優選的，其篩選方法包括：
(1)制備MMP-9親和層析柱：將MMP-9蛋白與壓積CNBr-Sepharose?4B混合，
依次經過交聯、清洗、封閉、再次清洗、裝柱、平衡，得到MMP-9親和層析柱；
(2)制備MMP-9/NGAL復合物親和層析柱：將蛋白NGAL溶液過MMP-9親和
層析柱；再洗脫多余的NGAL蛋白；
(3)親和層析：將NGAL抗體溶液通過步驟(1)所制備的親和層析柱，去除非特
異性吸附后進行解吸，分段收集解吸液，透析，冷凍干燥，即得。
3.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述包被NGAL抗體的膠乳
顆粒的制備方法包括：
(1)制備羧化改性聚苯乙烯膠乳溶液：取粒徑為105-145nm的聚苯乙烯膠乳顆粒
干燥物，用緩沖液分散，加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺和硫代NHS，
室溫下攪拌反應；離心棄上清，再用緩沖液稀釋分散沉淀膠乳，得到羧化改性聚苯乙
烯膠乳；
(2)NGAL抗體溶液的制備：將篩選得到的既能和中性粒細胞明膠酶相關脂質運
載蛋白抗原結合又能和MMP-9/NGAL復合物相結合的NGAL單克隆抗體或多克隆抗體用
去離子水溶解，得到NGAL抗體溶液；
(3)包被NGAL抗體的膠乳顆粒的制備：將步驟(2)所制備的抗體溶液用緩沖液
稀釋后，加入羧化改性聚苯乙烯膠乳溶液，在室溫下攪拌反應，終止反應后，離心棄
上清，洗滌沉淀，即得。
4.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：所述的表面活性劑為曲拉
通X-100；所述的防腐劑為Proclin-300；所述的穩定劑為蔗糖；所述的促凝劑為
PEG-6000或PEG-8000；所述的阻斷劑為類風濕因子阻斷劑；所述的螯合劑為乙二胺
四乙酸二鈉；所述的助懸劑為乙二醇；所述的封閉劑為牛血清白蛋白。
5.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：試劑Ⅰ中所述的生物緩沖
劑為三羥甲基氨基甲烷，試劑Ⅱ中所述的生物緩沖劑為3-(N-嗎啉)丙磺酸。
6.按照權利要求1所述的檢測試劑盒，其特征在于：每1升試劑Ⅰ中各組分的
用量為：生物緩沖劑5-100g，表面活性劑0.5-20mL，促凝劑2-50g，防腐劑0.02-1mL，
穩定劑1-60g，阻斷劑1-10mL，螯合劑0.05-5g，余量為水；
每1升試劑Ⅱ中各組分的用量為：包被NGAL抗體的膠乳顆粒0.1-10g，生物
緩沖劑1-100g，螯合劑0.1-10g，表面活性劑0.05-3mL，防腐劑0.02-1mL，助懸劑
5-50mL，封閉劑5-50g，穩定劑50-150g，余量為水。
7.按照權利要求6所述的試劑盒，其特征在于：每1升試劑Ⅰ中各組分的用
量為：生物緩沖劑7-20g，表面活性劑1-10mL，促凝劑10-30g，防腐劑0.1-0.5mL，
穩定劑5-15g，阻斷劑3-6mL，螯合劑0.1-1g，余量為水；
每1升試劑Ⅱ中各組分的用量為：包被NGAL抗體的膠乳顆粒0.5-5g，生物緩
沖劑5-30g，螯合劑0.5-4g，表面活性劑0.5-2mL，防腐劑0.1-0.5mL，助懸劑10-40
mL，封閉劑7-15g，穩定劑80-120g。
8.按照權利要求7所述的試劑盒，其特征在于：每1升試劑Ⅰ中各組分的用量
為：生物緩沖劑12g，表面活性劑4mL，促凝劑15g，防腐劑0.25mL，穩定劑10g，
阻斷劑5mL，螯合劑0.4g，余量為水；
每1升試劑Ⅱ中各組分的用量為：包被NGAL抗體的膠乳顆粒1.7g，生物緩沖
劑11g，螯合劑2g，表面活性劑1.5mL，防腐劑0.25mL，助懸劑20mL，封閉劑10
g，穩定劑100g。
9.按照權利要求1-8任何一項的檢測試劑盒，其特征在于：試劑Ⅰ的pH值的
范圍為7.0-8.0，試劑Ⅱ的pH值的范圍為6.5-7.5。
10.一種制備權利要求1-8任何一項所述檢測試劑盒的方法，包括：(1)制備試
劑Ⅰ：將各組分溶解于蒸餾水或雙蒸水中，混合均勻，定容；(2)制備試劑Ⅱ：將各
組分溶解于蒸餾水或雙蒸水中，混合均勻，定容；(3)將試劑Ⅰ和試劑Ⅱ單獨分裝，
密封，即得。
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