本發(fā)明提供了一種安普霉素的磁免疫化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒，它包括：酶標(biāo)抗原、酶標(biāo)抗原稀釋液、磁標(biāo)抗體、磁標(biāo)抗體稀釋液、安普霉素系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液、化學(xué)發(fā)光底物A液、化學(xué)發(fā)光底物B液、復(fù)溶液、洗滌液，其中酶標(biāo)抗原是辣根過氧化物酶標(biāo)記的安普霉素半抗原，磁標(biāo)抗體是免疫磁珠標(biāo)記的安普霉素單克隆抗體。本發(fā)明還公開了一種利用上述試劑盒配套化學(xué)發(fā)光檢測儀檢測牛奶中安普霉素殘留量的方法，本方法對(duì)安普霉素檢測具有較高的靈敏度、特異性和較短的檢測時(shí)間。

1.一種安普霉素的磁免疫化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒，包括酶標(biāo)抗原、酶標(biāo)抗原稀釋液、磁標(biāo)抗體、磁標(biāo)抗體稀釋液、安普霉素系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液、化學(xué)發(fā)光底物A液、化學(xué)發(fā)光底物B液、復(fù)溶液、洗滌液；其特征在于：所述酶標(biāo)抗原是辣根過氧化物酶標(biāo)記的安普霉素半抗原，所述磁標(biāo)抗體是免疫磁珠標(biāo)記的安普霉素單克隆抗體，所述安普霉素單克隆抗體是由安普霉素半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到的偶聯(lián)物作為免疫原免疫動(dòng)物制備獲得；所述安普霉素半抗原的合成方法為：取安普霉素1.0g，加吡啶50mL溶解，加重鉻酸吡啶0.83g，80℃攪拌3h，停止反應(yīng)，旋蒸，蒸干，加甲苯，旋蒸，蒸干，得到黑色油狀物，上硅膠柱，體積比為5:1的二氯甲烷/甲醇洗脫分離，得到醛基安普霉素0.89g；取0.89g醛基安普霉素，加甲醇80mL溶解，加己二酸1-酰肼0.32g，加碳酸鈉0.3g，室溫?cái)嚢?h，停止反應(yīng)，旋蒸，除去甲醇，加水，乙酸乙酯萃取震蕩，旋蒸蒸干，體積比為1:1的二氯甲烷/甲醇重結(jié)晶，得到羧酸安普霉素0.71g，即為安普霉素半抗原，其分子結(jié)構(gòu)式為： 2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述免疫磁珠表面含有—OH、—COOH或—NH₂活性基團(tuán)。3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述化學(xué)發(fā)光底物A液為含有魯米諾和對(duì)甲苯酚的三羥甲基氨基甲烷溶液，化學(xué)發(fā)光底物B液為含有檸檬酸、無水Na₂HPO₄和CO(NH₂)₂·H₂O₂的水溶液。4.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒配套化學(xué)發(fā)光檢測儀檢測安普霉素的殘留量。5.一種利用權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的試劑盒檢測安普霉素的方法，包括下列步驟：1)將酶標(biāo)抗原與酶標(biāo)抗原稀釋液按照1:10～1:20的體積比進(jìn)行稀釋，裝入化學(xué)發(fā)光檢測儀酶標(biāo)抗原工作液容器中；2)將磁標(biāo)抗體與磁標(biāo)抗體稀釋液按照1:10～1:20的體積比進(jìn)行稀釋，裝入化學(xué)發(fā)光檢測儀磁標(biāo)抗體工作液容器中；3)化學(xué)發(fā)光檢測儀分別吸取30～60μL酶標(biāo)抗原工作液、30～60μL待測樣品液和30～60μL磁標(biāo)抗體工作液，依次加入到反應(yīng)杯存儲(chǔ)裝置中，室溫下反應(yīng)15min，再通過清洗裝置進(jìn)行磁分離2～4min，棄上清液后用洗滌液300～500μL對(duì)復(fù)合物沉淀清洗3～5次；4)將分離好的復(fù)合物放入測量暗箱，加入化學(xué)發(fā)光底物A液和化學(xué)發(fā)光底物B液各50μL，檢測發(fā)出的相對(duì)光強(qiáng)度，樣品中安普霉素的含量與相對(duì)光強(qiáng)度成負(fù)相關(guān)關(guān)系，通過相對(duì)光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算安普霉素的殘留量。