本發明公開用于檢測干血片樣本中的待檢測物的方法和試劑盒及用途。其中，用于檢測干血片樣本中的待檢測物的方法包括從干血片樣本中分離代謝產物的步驟；和從干血片樣本中分離遺傳物質的步驟。本發明的方法可同時或使用更少量樣品進行多種不同待檢測物的檢測。通過本發明可以縮短新生兒疾病篩查、確診的時間，并且可以使用更少量的樣品。

1.試劑和吸附柱在制備用于檢測干血片樣本中的待檢測物的試劑盒中的用途，其中，所述試劑為(a)含甲醇、¹³C₆-Phe同位素內標及琥珀酰丙酮的溶液、(b)含10mM三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、1 mM乙二胺四乙酸鈉的水溶液和(c)酚氯仿；所述檢測包括以下步驟：(1) 從所述干血片樣本得到的一個血斑中分離代謝產物的步驟，其包括使用含甲醇、¹³C₆-Phe同位素內標及琥珀酰丙酮的溶液在40-50℃下振蕩處理所述一個血斑30-60分鐘，并經分離得到第一上清液和沉淀物，其中，所述干血片樣本是指在樣本收集位點收集的一滴靜脈血或末梢血滴加至干血片后得到的樣本，所述血斑是指用直徑為3.2mm的打孔器在干血斑的中央位置進行打孔得到的血斑；(2) 使用含10 mM三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、1 mM 乙二胺四乙酸鈉的水溶液處理所述沉淀物，之后添加酚氯仿混合液進一步處理，經離心后得到第二上清液；(3) 利用吸附柱從所述第二上清液中純化遺傳物質，得到分離的遺傳物質的步驟；(4) 利用串聯質譜分析所述第一上清液中的苯丙氨酸的步驟；和(5) 利用所述遺傳物質構建二代測序文庫的步驟，其包括利用二代測序結果檢測PAH基因第158位的G堿基是否突變為A堿基，及PAH基因的第611位點的A堿基是否突變為G堿基。