1.TUBA抗原在制備診斷血管炎性疾病的臨床診斷試劑或檢測物中的應用,所述TUBA的
序列如SEQ ID NO.1所示;所述血管炎性疾病選自白塞病。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于:以常規方法制備TUBA抗原,建立檢測抗
TUBA抗體的定量方法及配套試劑盒;所述定量方法為:
1)包板:以pH9.6的碳酸鹽緩沖液稀釋TUBA,濃度10μg/ml,包被96孔板,100μl/孔,4℃
包板過夜;
2)洗板:含0.05%Tween20的PBS,即PBS-T,洗板4次,每次5分鐘;
3)封閉:加入3%BSA-PBS,300μl/孔,37℃封閉3.5小時;
4)洗板:以0.05%PBS-T洗板4次,每次5分鐘;
5)一抗孵育:加入病人及健康對照血清,100μl/孔,血清以含1%BSA的PBS-T1∶400稀
釋,37℃孵育1小時;
6)洗板:PBS-T洗板6次,每次5分鐘;
7)二抗孵育:加入以含1%BSA的PBS-T1∶5000稀釋的辣根過氧化物酶標記的山羊抗人
IgG,37℃孵育30分鐘,洗板4次;
8)顯色:加入OPD顯色液,100μl/孔,避光反應10分鐘;
9)終止:以2mol/L硫酸終止反應,450nm讀取OD值;
10)對照及結果計算:所有樣品均做復孔,每板均設陽性對照、陰性對照:分別以健康人
抗TUBA抗體均值+2標準偏差AU值定為陽性閾值,
AU值=[OD肽-OD非特異背景]待測血清/[OD肽-OD非特異背景]標準血清×100,標準血清為陽性
標準血清。
3.一種診斷血管炎性疾病的血液診斷試劑,其特征在于:包括TUBA蛋白、HRP-IgG抗體,
以及血液診斷試劑中的常規試劑,所述TUBA的序列如SEQ ID NO.1所示;所述血管炎性疾病
選自白塞病;所述血液診斷試劑中的常規試劑包括碳酸鹽緩沖液、PBST洗液、封閉液、顯色
液和終止液。
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