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抗TUBA抗體在白塞病診斷中的應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-24
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510161229.8 
  • 技術(專利)名稱 抗TUBA抗體在白塞病診斷中的應用 
  • 項目單位 北京大學人民醫院
  • 發明人 栗占國,程永靜,孫曉麟 
  • 行業類別
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 尤美烘
  • 發布時間 2021-12-24  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及使用蛋白TUBA作為抗原,檢測白塞病患者外周血中針對Tubulin的抗體,從而實現對白塞病患者的診斷。具體為以常規方法表達TUBA蛋白,建立檢測抗TUBA抗體的定性或定量方法及配套試劑盒。
    展開
  • 02

    說明書

    1.TUBA抗原在制備診斷血管炎性疾病的臨床診斷試劑或檢測物中的應用,所述TUBA的
    序列如SEQ ID NO.1所示;所述血管炎性疾病選自白塞病。
    2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于:以常規方法制備TUBA抗原,建立檢測抗
    TUBA抗體的定量方法及配套試劑盒;所述定量方法為:
    1)包板:以pH9.6的碳酸鹽緩沖液稀釋TUBA,濃度10μg/ml,包被96孔板,100μl/孔,4℃
    包板過夜;
    2)洗板:含0.05%Tween20的PBS,即PBS-T,洗板4次,每次5分鐘;
    3)封閉:加入3%BSA-PBS,300μl/孔,37℃封閉3.5小時;
    4)洗板:以0.05%PBS-T洗板4次,每次5分鐘;
    5)一抗孵育:加入病人及健康對照血清,100μl/孔,血清以含1%BSA的PBS-T1∶400稀
    釋,37℃孵育1小時;
    6)洗板:PBS-T洗板6次,每次5分鐘;
    7)二抗孵育:加入以含1%BSA的PBS-T1∶5000稀釋的辣根過氧化物酶標記的山羊抗人
    IgG,37℃孵育30分鐘,洗板4次;
    8)顯色:加入OPD顯色液,100μl/孔,避光反應10分鐘;
    9)終止:以2mol/L硫酸終止反應,450nm讀取OD值;
    10)對照及結果計算:所有樣品均做復孔,每板均設陽性對照、陰性對照:分別以健康人
    抗TUBA抗體均值+2標準偏差AU值定為陽性閾值,
    AU值=[OD肽-OD非特異背景]待測血清/[OD肽-OD非特異背景]標準血清×100,標準血清為陽性
    標準血清。
    3.一種診斷血管炎性疾病的血液診斷試劑,其特征在于:包括TUBA蛋白、HRP-IgG抗體,
    以及血液診斷試劑中的常規試劑,所述TUBA的序列如SEQ ID NO.1所示;所述血管炎性疾病
    選自白塞病;所述血液診斷試劑中的常規試劑包括碳酸鹽緩沖液、PBST洗液、封閉液、顯色
    液和終止液。
    展開

專利技術附圖

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