1.仿生三維流體切應力細胞培養裝置,其特征在于該裝置由蠕動泵(1)、灌注小室(2)、1轉8的轉接口(3)、空氣濾膜(4)、廢液瓶(5)、直通閥(6)、培養基(7)、儲液瓶(8)和處理硅膠管(9)組成,灌注小室(2)的一端與蠕動泵(1)連接,灌注小室(2)的另一端通過1轉8的轉接口(3)與廢液瓶(5)連接;廢液瓶通過直通閥(6)與儲液瓶(8)連接;儲液瓶(8)通過1轉8的轉接口(3)與蠕動泵(1)連接;其中,灌注小室(2)由玻璃注射器制成,可以觀察到灌注小室(2)內培養基(7)、細胞支架(16)及流體內的氣泡的情況,細胞支架(16)置于經機械徑向切割兩段的注射器活塞(17)之間,能夠基本保證流體完全通過細胞支架(16),使非灌流旁路減少到最少,活塞與注射器內壁間的緊密接觸滿足GB/T?1962.1-2001,達到泄漏率不超過0.005Pa·m3/s,灌注小室(2)上端由鈦板(13)及O型硅膠圈(11)密封,上端鈦板通(13)過鈦支架(15)與下端鈦板(13)連接,灌注小室上、下兩端分別設有流體流入口(10)和流出口;蠕動泵(1)頭有8個通道分別和8個灌注小室(2)連接,蠕動泵(1)另一端通過1轉8的轉接口(3)和鉑處理硅膠管(9)與儲液瓶(8)連接,能使用不同直徑的支架和注射器制成的不同灌注小室,減少了對實驗設計的限制。2.如權利要求1所述仿生三維流體切應力細胞培養裝置,其特征在于廢液瓶(5)和儲液瓶(8)內的鉑處理硅膠管(9)頂端封有空氣濾膜(4),有利于孵箱中的氧氣和二氧化碳進入培養系統內。3.如權利要求1或2所述仿生三維流體切應力細胞培養裝置的切應力加載方法,其特征在于該方法包括以下步驟:(1)實驗開始之前分別測定蠕動泵(1)每個通道的流速,流速控制到:10—60ml/min;(2)在無菌條件下,將接種了細胞的支架(16)固定于灌注小室(2)中,儲液瓶(8)和廢液瓶(5)中加入培養基(7),連接整個加力裝置;(3)打開蠕動泵(1),排出整個管道內空氣,根據實驗要求設定培養基(7)流速10—60ml/min;(4)將灌注小室(2)、廢液瓶(5)、直通閥(6)、儲液瓶(8)置于37°C,5%CO2培養箱內;?(5)隔天更換培養基(7),根據實驗需要設定加力時間為1-8天;(6)加力完成后,將接種有細胞的支架(16)取出,進行掃描電鏡觀察細胞生長情況,免疫組化,RT-PCR分別檢測待測蛋白及基因的表達。?
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