本發(fā)明的目的在于高再現性地制作標記化探針-載體復合物，其用于對被測物質進行高靈敏度且穩(wěn)定的檢測和測定。其中，在標記物與探針-水溶性載體的結合中，利用親和素、鏈霉親和素等親和素類與生物素的特異性結合，且在與載體結合之前進行該親和素類與探針的結合。即，在使跟被測物質結合的物質與親和素類結合之后，使該結合體與高分子水溶性載體結合來制作親和素化探針-水溶性載體復合物，通過在該親和素化探針-水溶性載體復合物中混合生物素化標記物，再現性良好地得到可藉由親和素類與生物素的特異性結合來高靈敏度地檢測和測定出被測物質的穩(wěn)定的標記化探針-水溶性載體復合物。

1.一種標記化探針-水溶性載體復合物的制作方法，其包括下述工序：
工序1.使具有硫羥基、可與被測物質結合的探針與具有馬來酰亞胺基的親和素
類結合，制成探針結合體；
工序2.接下來，使具有硫羥基的所述探針結合體與具有馬來酰亞胺基的高分子
水溶性載體結合，制成探針結合體-水溶性載體復合物；和
工序3.進一步將所述探針結合體-水溶性載體復合物與生物素化標記物混合，使
探針結合體-水溶性載體復合物的親和素類與生物素化標記物的生物素結合。
2.如權利要求1所述的方法，其中，親和素類為親和素或鏈霉親和素。
3.如權利要求1或2所述的方法，其中，水溶性載體的分子量為50萬以上。
4.如權利要求1或2所述的方法，其中，水溶性載體選自葡聚糖、氨基葡聚糖、
糊精、聚蔗糖或普魯蘭多糖。
5.如權利要求1或2所述的方法，其中，水溶性載體選自葡聚糖、氨基葡聚糖、
集束糊精、聚蔗糖或普魯蘭多糖。
6.如權利要求1或2所述的方法，其中，可與被測物質結合的探針為抗體或抗
體片段。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，該方法使用兩種以上的抗體或抗體
片段。
8.如權利要求6所述的方法，其中，抗體或抗體片段選自Fab’、F(ab’)₂、Fab或
IgG。
9.如權利要求7所述的方法，其中，抗體或抗體片段選自Fab’、F(ab’)₂、Fab或
IgG。
10.如權利要求1或2所述的方法，其中，可與被測物質結合的探針選自蛋白G、
蛋白A、蛋白L、凝集素或受體。
11.如權利要求1或2所述的方法，其中，生物素化標記物選自生物素化熒光素
酶、生物素化堿性磷酸酶、生物素化過氧化物酶、生物素化葡糖氧化酶、生物素化異
硫氰酸熒光素、生物素化吖啶鎓、生物素化吖啶鎓衍生物或生物素化三(2,2’-聯吡啶)
釕(II)。
12.如權利要求11所述的方法，其中，生物素化熒光素酶是通過基因重組制作
的。
13.一種標記化探針-水溶性載體復合物，其是通過權利要求1～12任一項所述的
方法來制作的。
14.一種測定法，其使用通過權利要求1～12任一項所述的方法制作的標記化探
針-水溶性載體復合物。
15.一種免疫測定法，其使用通過權利要求1～9或11～12任一項所述的方法制
作的標記化探針-水溶性載體復合物。
16.一種高靈敏度測定法，其使用通過權利要求1～12任一項所述的方法制作的
標記化探針-水溶性載體復合物。