本發明公開了一種對蛋白質進行快速熒光標記的方法，制備GFP帽子探針，利用它能與融合在蛋白質loop上的小肽GFP10?11通過特異性非共價相互作用結合后產生綠色熒光的性質，實現對蛋白質快速、特異性的熒光標記和定量檢測。本發明特異性高，且基本無背景熒光。GFP帽子探針本身基本不能被激發出熒光，只有GFP帽子探針與GFP10?11特異性結合后才能產生熒光；使用方便；激發波長峰值為482nm左右，發生波長峰值為507nm左右，與綠色熒光蛋白基本一致，可采用常規的熒光顯微鏡、熒光光譜儀檢測。實現熒光標記時間的控制，標記濃度的控制。本發明還能標記細胞表面蛋白，實現對細胞表面蛋白的定量以及示蹤，能夠用于篩選與細胞表面蛋白內化、多聚化等相關的藥物。

1.一種對蛋白質進行快速熒光標記的方法，其特征在于，將一段能與GFP帽子探針特異
性結合的小肽GFP10-11融合于目的蛋白的loop區中，融合表達后加入體外制備的可溶的
GFP帽子探針，GFP帽子探針即為GFP1-9探針，通過GFP1-9探針與小肽GFP10-11非共價作用
特異性結合；結合后產生熒光，從而引入熒光標記，小肽GFP10-11的氨基酸序列如序列表中
的序列2所示；所述GFP1-9探針的制備方法：GFP1-9探針是由氨基酸序列如序列表中的序列
1所示的綠色熒光蛋白經過分子生物學酶酶切而制備得到，酶切后得到的GFP1-9探針的氨
基酸序列如序列表中的序列3所示。
2.根據權利要求1所述的對蛋白質進行快速熒光標記的方法，其特征在于，還能用于在
細胞表面對蛋白質進行快速熒光標記。
3.根據權利要求1-2任一所述的對蛋白質進行快速熒光標記的方法，其特征在于，用于
細胞表面蛋白的表達水平的定量，用于示蹤細胞表面蛋白的內化和多聚化，用于篩選細胞
表面蛋白內化和多聚化相關的藥物。
4.根據權利要求1-2任一所述的對蛋白質進行快速熒光標記的方法，其特征在于，所述
序列還包括其衍生和/或突變序列。