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基于核酸適配體信號(hào)放大策略的檢測(cè)微囊藻毒素的SPR傳感器及其制備方法和應(yīng)用

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-10-16
  • 技術(shù)成熟度:通過中試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào) CN201610846741.0 
  • 技術(shù)(專利)名稱 基于核酸適配體信號(hào)放大策略的檢測(cè)微囊藻毒素的SPR傳感器及其制備方法和應(yīng)用 
  • 項(xiàng)目單位 中國(guó)科學(xué)院重慶綠色智能技術(shù)研究院
  • 發(fā)明人 曹海燕,黃昱,魏東山,張華,湯冬云 
  • 行業(yè)類別
  • 技術(shù)成熟度 通過中試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 韓芳佳
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-10-16  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明屬于毒素檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域,公開了基于核酸適配體信號(hào)放大策略的檢測(cè)微囊藻毒素的SPR傳感器及其制備方法和應(yīng)用。該SPR傳感器包括玻璃芯片、微囊藻毒素適配體、DNA探針1、DNA探針2和貴金屬納米材料,能夠通過測(cè)定SPR信號(hào)變化進(jìn)行微囊藻毒素的檢測(cè)。本發(fā)明SPR傳感器制備方法簡(jiǎn)單,檢測(cè)速度快、選擇性高、穩(wěn)定性好、適用范圍寬、操作簡(jiǎn)單,易于構(gòu)建野外監(jiān)測(cè)便攜檢測(cè)儀器,而且成本遠(yuǎn)低于大型的分析檢測(cè)儀器。
    展開
  • 02

    說明書

    1.基于核酸適配體信號(hào)放大策略的檢測(cè)微囊藻毒素的SPR傳感器,其特征在于,所述傳
    感器包括玻璃芯片、微囊藻毒素適配體、DNA探針1、DNA探針2和貴金屬納米材料;所述玻璃
    芯片的表面負(fù)載一層貴金屬納米層,所述DNA探針1通過5’端修飾的巰基與所述玻璃芯片表
    面負(fù)載的貴金屬納米層通過共價(jià)鍵結(jié)合;所述DNA探針2通過3’端修飾的巰基與貴金屬納米
    材料結(jié)合;所述DNA探針1的5’端與所述DNA探針2的3’端互補(bǔ)結(jié)合;所述微囊藻毒素適配體
    一端與所述DNA探針1的3’端互補(bǔ)結(jié)合,另一端與所述DNA探針2的5’ 端互補(bǔ)結(jié)合。
    2.如權(quán)利要求1所述的SPR傳感器,其特征在于,所述DNA探針1為堿基序列如SEQ ID
    No.1所示的單鏈DNA;所述DNA探針2為堿基序列如SEQ ID No.2所示的單鏈DNA;所述微囊藻
    毒素適配體為堿基序列如SEQ ID No.3所示的單鏈DNA。
    3.如權(quán)利要求1所述的SPR傳感器,其特征在于,所述貴金屬納米層的厚度為10-20 nm。
    4.如權(quán)利要求1所述的SPR傳感器,其特征在于,所述貴金屬納米材料的粒徑是30-50
    nm。
    5.如權(quán)利要求1所述的SPR傳感器,其特征在于,所述貴金屬包括金、銀或銅。
    6.權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的SPR傳感器的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
    (1)制備玻璃芯片:將玻片清洗使表面為帶正電荷的氨基,然后浸入檸檬酸穩(wěn)定貴金屬
    納米材料中使貴金屬納米材料通過靜電作用力沉積于處理后的玻片上,得玻璃芯片;
    (2)DNA探針1修飾玻璃芯片:將步驟(1)所得玻璃芯片浸入含DNA探針1溶液中,使所述
    DNA探針1通過共價(jià)鍵與玻璃芯片表面負(fù)載的貴金屬納米層結(jié)合;
    (3)DNA探針2修飾貴金屬納米材料:將DNA探針2加入貴金屬納米材料中,使所述DNA探
    針2通過共價(jià)鍵與貴金屬納米材料表面結(jié)合;
    (4)SPR傳感器制備:將步驟(2)中DNA探針1修飾的玻璃芯片浸入DNA探針2修飾貴金屬
    納米材料中,然后加入微囊藻毒素適配體,得SPR傳感器。
    7.如權(quán)利要求6所述制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
    (1)制備玻璃芯片:玻片先通過氨水:過氧化氫:超純水體積比例為1:1:1的混合溶液清
    洗1 h,然后在無(wú)水條件下置于10% 氨丙基三甲氧基硅烷的乙醇溶液中10 min,再用超純水
    清洗,使表面為帶正電荷的氨基,最后浸入檸檬酸穩(wěn)定貴金屬納米材料中2 h使貴金屬納米
    材料通過靜電作用力沉積于處理后的玻片上,得玻璃芯片;
    (2)DNA探針1修飾玻璃芯片:將步驟(1)所得玻璃芯片浸入含DNA探針1溶液中1 h,使所
    述DNA探針1通過共價(jià)鍵與玻璃芯片表面負(fù)載的貴金屬納米層結(jié)合;
    (3)DNA探針2修飾貴金屬納米材料:將DNA探針2加入貴金屬納米材料中1 h,使所述DNA
    探針2通過共價(jià)鍵與貴金屬納米材料表面結(jié)合,然后進(jìn)行超濾,除去未結(jié)合的DNA探針2;
    (4)SPR傳感器制備:將步驟(2)中DNA探針1修飾玻璃芯片浸入DNA探針2修飾貴金屬納
    米材料中,然后加入微囊藻毒素適配體,得SPR傳感器。
    8.權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的SPR傳感器在檢測(cè)微囊藻毒素中的應(yīng)用。
    9.利用權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的SPR傳感器檢測(cè)微囊藻毒素的方法,其特征在于:將
    所述SPR傳感器加入含有微囊藻毒素的溶液中,測(cè)定SPR信號(hào)變化即可。
    展開

專利技術(shù)附圖

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