1.一種檢測(cè)小牛血清去蛋白注射液中單磷酸腺苷含量的方法,包括如下步驟:
(1)測(cè)定熒光共振能量轉(zhuǎn)移探針于526nm處的熒光發(fā)射峰的強(qiáng)度,記作F
0;
(2)向所述熒光共振能量轉(zhuǎn)移探針中加入待測(cè)的小牛血清去蛋白注射液進(jìn)行反應(yīng);測(cè)
定所述反應(yīng)后的體系于526nm處的熒光發(fā)射峰的強(qiáng)度,記作F;
(3)根據(jù)式(1)所示的Stern-Volmer方程,即能計(jì)算出所述小牛血清去蛋白注射液中單
磷酸腺苷的含量;
F 0 F = 1 + k Q τ 0 [ Q ] = 1 + K D [ Q ] - - - ( 1 ) ]]>
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式(1)中,[Q]表示待測(cè)小牛血清去蛋白注射液中單磷酸腺苷的摩爾濃度,τ
0表示所述熒
光共振能量轉(zhuǎn)移探針的平均熒光壽命,為1.5×10
-9s,k
Q表示熒光淬滅速率常數(shù),為1.2×
10
11L·mol
-1·s
-1,K
D表示Stern-Volmer常數(shù);
所述熒光共振能量轉(zhuǎn)移探針的能量供體和能量受體分別為β-環(huán)糊精修飾的ZnS量子點(diǎn)
和三羥基黃酮,所述β-環(huán)糊精修飾的ZnS量子點(diǎn)的粒徑為2~4nm;所述熒光共振能量轉(zhuǎn)移探
針的pH值為4.5;
所述待測(cè)的小牛血清去蛋白注射液是按照包括如下步驟的方法進(jìn)行前處理的:
a)向所述待測(cè)的小牛血清去蛋白注射液中加入NaOH水溶液,并進(jìn)行煮制,將體系的pH
值調(diào)至6.8~7.2;
b)向步驟a)處理后的體系中加入活性炭進(jìn)行吸附;
c)將步驟b)處理后的體系用微孔膜進(jìn)行過濾;
d)對(duì)經(jīng)步驟c)處理后的體系進(jìn)行固相萃取,洗脫劑為甲醇,收集洗脫液,即完成對(duì)所述
小牛血清去蛋白注射液的前處理。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中,所述反應(yīng)的溫度為20℃~25
℃,所述反應(yīng)的時(shí)間為10~20min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:步驟a)中,所述NaOH水溶液的摩爾濃度
為6mol/L,所述NaOH水溶液與所述待測(cè)的小牛血清去蛋白注射液的體積比為1:1;
在水浴的條件下進(jìn)行煮制;所述煮制的溫度為59~61℃,時(shí)間為35~45min。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于:步驟b)中,所述活性炭的質(zhì)量加入量為所
述待測(cè)的小牛血清去蛋白注射液質(zhì)量的1.8%~2.0%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于:步驟c)中,所述微孔膜的孔徑為0.22μm。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于:步驟d)中,所述固相萃取的固體吸附劑為
C18。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于:所述熒光共振能量轉(zhuǎn)移探針中,所述β-環(huán)
糊精修飾的ZnS量子點(diǎn)的摩爾濃度為5.0×10
-5~7.5×10
-5mol/L,所述三羥基黃酮的摩爾
濃度為1.0×10
-6~2.5×10
-6mol/L,所述β-環(huán)糊精修飾的ZnS量子點(diǎn)與所述三羥基黃酮的
摩爾比為20:1。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于:所述熒光共振能量轉(zhuǎn)移探針中,所述β-環(huán)
糊精修飾的ZnS量子點(diǎn)的摩爾濃度為5.0×10
-5mol/L,所述三羥基黃酮的摩爾濃度為2.5×
10
-6mol/L。
9.熒光共振能量轉(zhuǎn)移探針在檢測(cè)藥物中單磷酸腺苷中的應(yīng)用;
所述熒光共振能量轉(zhuǎn)移探針的能量供體和能量受體分別為β-環(huán)糊精修飾的ZnS量子點(diǎn)
和三羥基黃酮,所述β-環(huán)糊精修飾的ZnS量子點(diǎn)的粒徑為2~4nm;所述熒光共振能量轉(zhuǎn)移探
針的pH值為4.5。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于:所述藥物為小牛血清去蛋白注射液。