本發明公開基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8?OhdG活性的方法，包括以下步驟：帶有巰基的DNA四面體結構的制備；帶有巰基的DNA四面體結構在金電極上的修飾得到頂端連接8?OHdG適體的巰基的DNA四面體結構的電極；G?四鏈體電極的形成；聚苯胺沉積的電化學傳感電極；利用電化學方法對產生的聚苯胺的電流信號進行檢測從而檢測8?OhdG的活性。本發明極大地提高了8?OHdG的檢測靈敏度。與傳統的以8?OHdG還原峰為信號的電化學檢測方法相比，檢測限降低2個數量級。本發明無需制備復雜材料以及標記DNA探針，可避免材料制備及標記DNA探針而導致檢測成本高、操作煩瑣，重現性差的缺陷。本發明具有成本低、快速、簡便、靈敏度高的優點。

1.基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8-OhdG活性的方法，其特征在于，包括以
下步驟：
1）帶有巰基的DNA四面體結構的制備；
2）帶有巰基的DNA四面體結構在金電極上的修飾得到頂端連接8-OHdG適體的巰基的
DNA四面體結構的電極；
3）頂端連接8-OHdG適體的巰基的DNA四面體結構的電極中加入8-OHdG和輔助因子氯化
血紅素的條件下8-OHdG適體的空間構型發生變化，形成具有G-四鏈體結構的電極，G-四鏈
體結構具有辣根過氧化物模擬酶性質；
4）G-四鏈體電極中加入過氧化氫和苯胺的CH₃COOH-CH₃COONa緩沖溶液，G-四鏈體作為
辣根過氧化物模擬酶催化苯胺形成聚苯胺得到聚苯胺沉積的電化學傳感電極；
5）利用電化學方法對產生的聚苯胺的電流信號進行檢測從而檢測8-OhdG的活性；
所述步驟1）的具體步驟如下：將5’端修飾了巰基的A、B、C三條單鏈和5’端接了8-羥基
脫氧鳥苷適體的D鏈各0.5~2μL等比例混合在40~50μL TM 緩沖液和0.5~2μL TCEP中，配成
終濃度為0.5~2μM的樣品，然后將配好的樣品放入90~100℃熱水浴中持續3~10 min，然后迅
速降溫到1~5℃，并在1~5℃中持續20~40分鐘以上，即可得到帶有巰基的DNA四面體結構；
所述步驟2）的具體步驟如下：將帶有巰基的DNA四面體結構滴加到清洗干凈的電極表
面，蓋上燒杯，常溫過夜組裝即得。
2.根據權利要求1所述的基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8-OhdG活性的方
法，其特征在于，所述步驟3）的具體步驟如下：PBS緩沖液沖洗步驟2）得到的電極的表面，除
去非特異性結合，在電極表面滴加濃度不同的8-羥基脫氧鳥苷，室溫反應1小時，PBS緩沖液
沖洗，滴加氯化血紅素溶液，室溫反應1小時，即得G-四鏈體結構的電極。
3.根據權利要求2所述的基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8-OhdG活性的方
法，其特征在于，所述步驟3）中的氯化血紅素溶液的濃度為0~20μM。
4.根據權利要求2所述的基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8-OhdG活性的方
法，其特征在于，所述步驟4）中苯胺和過氧化氫的濃度均為80~120mM。
5.根據權利要求1所述的基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8-OhdG活性的方
法，其特征在于，所述步驟1）中TM緩沖溶液為含有pH =8.0的20 mM Tris-HCl溶液和50mM
MgCl₂溶液，所述CH₃COOH-CH₃COONa緩沖溶液為含有100mM CH₃COOH和100mM CH₃COONa的pH=
4.3的緩沖溶液。
6.根據權利要求1所述的基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8-OhdG活性的方
法，其特征在于，所述步驟4）的反應時間為60~120min。
7.根據權利要求1基于苯胺沉積的電化學傳感電極定量檢測8-OhdG活性的方法，其特
征在于，所述步驟5）的具體步驟如下：將步驟4）修飾好的電極作為工作電極，用一個鉑電極
作為對電極，飽和甘汞電極作為參比電極，形成三電極體系，緩沖溶液中執行參數的設置如
下：電壓范圍-0.5 V到 0 V；電位增量：0.004V；脈沖寬度：0.05s ；采樣寬度：0.0167 s；脈
沖周期：0.2 s；靜置時間：2s。